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        分子互作求教

        相关实验:分子标记— AFLP 原理和操作步骤

        user-title

        caonajingdiyi

        做ELISA能做出结合曲线,而Octect BLI做不出来,请教大神级别来解答,万分感谢。可怜可怜苦恼的实验狗啊

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果您使用Octet BLI测定蛋白质相互作用,您可以获得响应图谱,但无法获得类似ELISA那样的结合曲线。不过,通过对响应图谱进行分析,如计算最大响应值、关联常数(Kd)等,您仍然可以评估蛋白质相互作用的强度和特异性。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        BLI要想成功有几个前提:

        1. 将已知分子牢固地偶联到固相上,并保持其生物活性;

        2. 尽量减少混合样品和固相之间的非特异性结合

        3. 确保洗脱的物质有足够的量来做质谱(浓度尽可能高,避免浓缩处理导致的损耗)

        4. 对垂钓鉴定结果进行验证。应用经纯化的样品,再次通过分子互作技术进行表征鉴定

        最常失败的原因就是非特异性结合,你可以从这方面入手检测一下

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