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        microRNA 实时定量pcr标准曲线相关问题

        相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

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        科研_小白

        这几天做microRNA实时定量pcr,标准曲线按比例稀释,分别是1:5/1:25/1:125,结果是原液ct值最小,前提是加样顺序都对,已做了2遍,结果是一样的,有相同经历的小伙伴可以分享一下经验吗

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        3 个回答

        user-title

        z流沙z

        有帮助

        原液浓度高,ct值小,这是正确的,稀释后ct值变大才符合

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        loveliufudan

        有帮助

        这种情况可能是因为标准曲线的稀释过程中发生了一些误差。如果标准曲线的制备过程有任何误差,那么标准曲线的斜率和截距会发生变化,从而影响定量的准确性。

        另外,你可以尝试使用更多的稀释比例制备标准曲线,比如1:10、1:50和1:100等。这样可以更加准确地确定最佳的稀释倍数。另外,在进行实时PCR时,还要注意实验条件的一致性,比如反应体系的配制、反应温度和时间等,以确保结果的准确性。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        那你可能是稀释的浓度掌握的不对,可以先把稀释倍数调整一下

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