• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        补实验的时候,以及想把同一材料的多个基因的表达放一张图,以看出来趋势的时候,如何进行板间校正?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

        user-title

        实验室小助理夏奇

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以用image做板间校正,把所有结果放在一张图上

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果您要进行板间校正(plate normalization),可以尝试使用以下方法:

        基于内参基因的标准曲线法:首先使用一个或多个内参基因(如GAPDH,β-actin等)构建标准曲线,并将不同板的样品分别进行PCR扩增和荧光检测,然后使用内参基因的Ct值进行标准曲线法计算,将不同板的数据转换成标准化数据。

        基于总RNA量的相对定量法:在RNA提取过程中,可以在不同板的样品中加入相同量的外源RNA(如同一种体积的外源RNA),并在每个板中使用相同量的总RNA进行cDNA合成和PCR扩增。然后,将不同板的目标基因的Ct值除以相应板的外源RNA的Ct值,计算相对表达量。

        基于内部标准品的标准曲线法:在不同板的PCR反应中,加入已知浓度的内部标准品,然后使用内部标准品的Ct值构建标准曲线,将不同板的样品数据转换成标准化数据。

        对于同一材料的多个基因的表达放一张图的情况,可以使用以下方法:

        在同一张图上同时显示多个基因的表达水平,以便直观比较它们之间的趋势。

        使用不同的颜色或样式来区分不同的基因,以便更容易识别。

        在图例中清楚地标注每个颜色或样式对应的基因名称和缩写。

        在图像上使用板间校正后的数据,以消除板间误差的影响,从而更准确地反映不同基因之间的表达趋势。

        user-title

        伯乐生命医学产品

        有帮助

        可使用CFX定量软件中的gene study功能进行多板分析,并通过每块反应板上的板间校正孔校正(板间校正孔指在不同次运行的PCR板放置同一扩增反应体系的孔)。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序