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        qPCR每次做结果都不一样,大多时候各组没有差异,怀疑QPCR不准

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        实验室小助理夏奇

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        4 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        先检查体系是否有降解,每次都不一致的话最可能的就是体系存在降解问题。

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        loveliufudan

        有帮助

        以下是一些可能导致aPCR结果不一致的常见因素:

        实验操作技术误差:例如反应体积的微小变化、反应管的不同、样品质量差异等因素可能导致PCR反应结果的不稳定性。

        实验条件差异:例如不同实验室的温度、湿度、pH值等因素可能导致PCR反应结果的不稳定性。

        实验试剂差异:例如不同批次的PCR试剂可能存在差异,如引物浓度、酶活性等方面的差异,这些因素可能导致PCR反应结果的不稳定性。

        数据分析方法差异:不同的数据分析方法可能会影响结果的稳定性,如不同的基准线选择、阈值设置等因素可能导致结果的不稳定性。

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        z流沙z

        有帮助

        首先排除操作是否有问题,可以添加阳性和阴性对照,其次确认细胞状态,状态不佳会影响实验结果

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        伯乐生命医学产品

        有帮助

        qPCR本身即是实时荧光定量相对定量,Ct值受荧光阈值和扩增曲线、扩增效率等因素影响以及技术误差,所以在预实验中要确认引物/探针特异性,扩增效率,扩增条件是否需优化,以期得到准确可靠的Ct值,在可靠的Ct值基础上进行基因表达分析。

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