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        实时荧光定量PCR为什么模板浓度高了反而CT值增大了?

        相关实验:实时 PCR 实验

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        瑶妹AKFI


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        4 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        可能是扩增效率低的原因,提高扩增效率

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        huarenqiang5

        有帮助

        考虑可能是出现非特异扩增或引物二聚体。

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        sswei

        有帮助

        样本浓度,非特异性扩增或者引物二聚体的情况,仪器、耗材、试剂都会对Ct值造成影响。

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        loveliufudan

        有帮助

        实时荧光定量PCR是一种非常灵敏的检测技术,通常可以检测非常低浓度的目标DNA分子。但是,当模板浓度过高时,可能会发生“抑制效应”,这会导致CT值的增加。

        抑制效应是指,在PCR反应中出现的一种现象,即PCR反应中的某些组分抑制了反应的进行。这些抑制物质可以是PCR反应中的其他组分,也可以是模板DNA本身。当模板DNA浓度过高时,会增加PCR反应中抑制物质的浓度,导致反应的抑制效应增加。

        此外,高模板浓度也可能导致PCR反应过早达到饱和,使荧光信号达到顶峰。这种情况下,进一步的PCR扩增将不会增加荧光信号,因此CT值将变大。

        因此,在进行实时荧光定量PCR时,需要优化反应条件和模板浓度,以确保PCR反应的可靠性和准确性。如果遇到CT值增加的情况,可以尝试优化PCR反应条件或降低模板浓度,以消除抑制效应。

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