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        请教一个qPCR实验的生物学重复问题。

        相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

        user-title

        天路旅客99

        我用慢病毒转染细胞敲低某基因,准备后续用qPCR实验验证敲低效率。病毒分为NC、sh1、sh2、sh3三组,请问我怎样转染才算规范得到3个生物学重复的细胞啊?以下:

        ① 1盘细胞消化传代,铺24孔板的12个孔,3个孔转染NC病毒、3个孔转染sh1病毒、3个孔转染sh2病毒、3个孔转染sh3病毒。

        ② 1盘细胞消化传代,铺24孔板的4个孔。1个孔转染NC病毒、1个孔转染sh1病毒、1个孔转染sh2病毒、1个孔转染sh3病毒。待转染成功后,传代,一个孔的NC细胞传成3个孔的细胞,sh1、sh2、sh3也是这样。

        请问我该选择哪种方式转染啊?

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        4 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        不用那么复杂的,你的三个sh就已经算是三次重复了

        user-title

        简简单单的8872

        有帮助

        选择第一种方式,然后将第一种方式的实验重复三次

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        感觉你这个说法有点糊涂,你可以转染四个孔,分别是NC,sh1,sh2,sh3,然后提取rna,反转录,上qPCR板的时候,每个上3个孔,就可以了。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        选择第二种方式重复效果好一些。

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