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        探针法与染料法有什么异同点?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        dxy_bz3louvw

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        3 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        探针法由于有参考曲线的存在,可以得到正确的定量值,而染料法只能大致估算。

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        1.荧光定量PCR探针法:探针法即除了引物外另外设置一个探针,在探针的两端分别带上发光集团和淬灭集团,这个时候,两个平衡不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被折断,释放出发光集团和淬灭集团,两个距离较远,发光集团产生荧光,被机器收集到信号,从而检测基因的量

        2、荧光定量PCR SYBR Green 染料法:染料能够与双链结合,当PCR扩增的时候,染料结合到DNA上,从而发光,单个的染料不发光,这样就能收集到信号,我们可以看出,染料法特异性不强,只要是双链的DNA都回结合发光。

        二、荧光定量PCR中探针法与染料法的优缺点

        1、探针法通过探针可以增加反应收集信号的特异性,只有探针结合的片段上发生扩增才能收集到信号,能够用多重体系反应的方法,能够预测和提前进行反应条件的优化,缺点是要合成探针,成本高

        2、染料法经济实惠,可以做溶解曲线,分析全部PCR产物的TM值,缺点就是特异性没有探针法好

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        huarenqiang5

        有帮助

        染料法是相对定量,有参比基团;

        探针法是绝对定量,有标准曲线进行对比。很多在做pcr检测时会选择盒子,比较盒子的好坏,染料法不仅要看CT 值,还要看溶解曲线的。

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