关于PCR曲线起始不平滑

1.自动基线问题

2.反应体系上机前混匀

3.八连管盖盖紧，防止体系蒸发导致基线抬升

1. 仪器方面：扩增曲线看起来噪声很大，检查仪器是否需要检修校正。

2. 试剂盒方面：可以尝试更换其他品牌的试剂盒尝试实验，是否还是同样的情况。质量不好的试剂盒有可能会出现不好的曲线。另外，仔细阅读说明书，看该试剂盒和仪器的型号是否匹配，是否需要加入校正试剂。

3. 八连管/PCR板方面：可尝试更换为白色管/板。

4. 样品方面：内参和溶解曲线如何？该扩增曲线是否为你所需要的基因？

这种情况可能是仪器需要校准了。

这个跟很多因素有关，一般试剂盒过期或不合格很有可能会出现这种情况，还有就是跟基因的表达有关，你可以用个内参试一下，如果曲线不平滑，可能是试剂出问题；否则的话，将你原来基因的模板浓度加大或调一下温度（一般55或60℃），这样还不行的话。估计得换引物和探针了，一定要确保你基因没有找错，不是染色体组的序列，且引物设计是在保守序列。