PCR实验中，我的目的条带有出来，但是野生型的条带却未出来，这是为什么？

首先要确定野生型和你的样本之间目的基因的差异，是不是你的样本目的基因存在特异性，野生型就无法扩增出特异的目的基因。

可能你的primer是专门针对你的目的条带的，无法扩增出wt条带

你把三条引物全部加在同一个试管中了么?如果是这样两种条带的产物可能对共用的引物产生竞争,比如,有可能其中一对引物与特异性的序列结合度比较高.而且你说了一个退火温度,有没有计算过这个温度是否对三条引物都适合,是不是比较接近其中一对引物的理想温度而造成这种条带差异.你可以先分开p一下看看.