请问pcr序列是这样的下一步怎么办

kDZ11

2022-06-20

之前的引物溶解曲线有点宽，温度77。重新设计了引物曲线差不多，温度78，然后就送去公司测序了，请问测序结果是这样的，接下来应该怎么办那，重新设计引物嘛（图片是新引物的曲线，加样误差确实有点大）

图片描述

这个是测序的结果

图片描述

汤姆卜丽波

2022-06-20

有帮助

再严谨操作加一次样测一次，还是这样就要换引物

bamboopiggy

2022-06-20

有帮助

绿色曲线的melt curve是可以的，但是估计是你的内参，另外一个引物的melt curve不行，确实是太宽了，你还是要重新设计，pcr以后的产物可以跑胶鉴定，不需要送测序。

灵枢天问

2022-06-20

有帮助

这还是重新设计引物的，对比好序列，特异性尽量高一点

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