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        请问我的目的基因的本身GC含量就比较高，该怎么样设计克隆引物？

        相关实验：任意引物 PCR

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        郝林英

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        3 个回答

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        克隆引物就正常设计就可以，退火温度可稍微设置高一点

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        汤姆卜丽波

        有帮助

        曾经看过一篇论文，可以采用高解链温度Tm和低引物对对解链温度差值的策略来设计引物

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        按照常规设计，如果tm值比较高，可以考虑用两步法进行pcr，有些高保真的酶，有专门的高GC的buffer用的。

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