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        关于gDNA基因组DNA

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        求知的小小鸟

        我提取gDNA跑pcr,gDNA浓度是99ug/ml,然后我用2ul所提取的gDNA来跑pcr之后用pcr产物跑胶,胶里面都没什么条带,是我的pcr取的gDNA量太少了吗?还有我这样是对的吗?

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        5 个回答

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        汤姆卜丽波

        有帮助

        一般pcr.扩增模板浓度几ng到100ng都可以,普通的酶就可以扩出来,应该不是浓度的问题,跑之前确定一下模板没有降解,然后引物特异性和有效率

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        dxywode

        有帮助

        可能原因很多啊 引物不好 退火温度不合适 或者载体上压根没有你要扩增的序列。

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        Eason老歌迷

        有帮助

        没有明显条带的情况,一是可能你的胶要配制0.8%来跑(如果你预计你的产物有15Kbp以上) ,二是改进反应条件。一句话,PCR反应中引物是特异的,P不出来要多做优化。

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        天一湖医者

        有帮助

        就是DNA的问题,它的浓度太高,而且在提取DNA时如果不纯,那么里的杂质就会太多,只有通过稀释DNA(同时也是稀释杂质),才能使DNA在样品里的浓度和杂质浓度的比值无限大,在这样的条件下,只要有足够的酶,那么,反应就能正常进行,得到预期的产物。

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        bamboopiggy

        有帮助

        genomic DNA 这个浓度是可以的,跑不出条带了,你先考虑一下你primer设计有没有问题,另外,你用的什么酶?

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