求助：跑pcr整不出来？
哦呦呦呦321
之前一直扩增一直扩不出来，然后师姐帮忙扩出来了，自己用同样的试剂还是扩不出来，然后就用之前师姐扩的再扩然后连接到T载上，但又出现问题了，菌液pcr P不出来，送去测序是成功的，为什么？以为是退火温度,所以1到6设的不同的温度，然后后面两个是之前的引物。mix是诺唯赞的
4 个回答
Eason老歌迷
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如果你测序有，但是扩增不出来，可能是模板dna被降解了?引物的浓度问题，引物设计的是不是合理等
天一湖医者
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直接菌液pcr，酶的耐受不支持，或者较差需要优化吧。
bamboopiggy
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这个跟mix没关系，跟人有关系，你的操作必定存在什么你没有注意到的bug，可能忘记加什么东西了，或者是什么东西用错了。菌落pcr出不来，可能是你菌液加少了。
汤姆卜丽波
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测序是成功的，然后pcr扩不来，那应该是引物降解了吧
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