• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        同一批样本,两次反转录成的cdna,为什么rt-pcr差异那么大?是反转录试剂新旧的问题吗?

        相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

        user-title

        cab2

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        1.你两次反转录时间间隔多久?时间长了,本身rna就会有降解。2.你反转录的效率每次和每次也是略有差异的,

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        原因太多了,这种情况最需避免的就是加样的时候造成了加样量之间的误差,建议多做几个重复,将重复中数据明显差距几个以上的循环的数据剔除。加样的时候样品混合好再分装。

        user-title

        未来9

        有帮助

        两次的差异大,可能是cDNA的保存问题,一般保存在-20度,但是时间长了就会有所降解.
        如果降解了,你再做,相对表达量就会降低.
        至于复孔之间的差异,我到觉得不是很大,0.5以内可以了,已经RT-PCR只是一个半定量的方法.

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序