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        RNA提取的时总出现双峰该怎么办?

        相关实验:聚合酶链式反应(PCR)

        user-title

        new杀杀杀

        首先非常感谢师兄师姐们对我问题的解答,由于程序的局限不能回复你们进行讨论,所以就再开一个话题,感谢大家的解答,问题如下: 1.使用NanoDrop2000仪器进行测量RNA的conc和260/280值时,曲线出现双峰,这说明了什么?可用吗? 2.用上述的RNA进行逆转录合成cDNA(所用试剂为TaKaRa),然后进行NanoDrop2000测量,conc为1050~1400左右,曲线为单峰,这说明了什么?可用吗?
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        1 个回答

        user-title

        极客医生

        有帮助
        双峰,不知是哪种样子的双峰(左右?上下?),如果是左右可能浓度太低吧,而且不是很纯,导致230值比较高。如果是上下,emmmm,你是不是选了两个值? 2)逆转录以后不用测浓度,很好奇你为什么测浓度。举个例子,你把反应完的PCR产物拿去测浓度,无论你的目的基因有没有扩增出来,NanoDrop测出来的浓度都是一样的,也就是说,测浓度是没用的,同理,反转录以后测浓度也没有用。一般是反转录前算好RNA浓度,如果是不同样品,不同浓度RNA,反转录时加入等量RNA就可以了,默认反转出来的cDNA也是一样的。
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