• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构：
    • 成为企业机构
    • 个人用户：
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        PT-PCR 两步法中为什么跑不出来曲线？

        相关实验：逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR，rtpcr）

        user-title

        隋美娇

        总RNA提取后，测试了浓度2640.32ng/ul 1.89ratio. 用CDNA合成试剂盒合成CDNA后跑PCR, PCR程序 50℃,2min 95℃ 10min (95℃ 15S 60℃ 60S 40个循环） 为什么始终跑不出来扩增曲线? 求大家指导 我已经尝试了不同的CDNA合成过程，用内参基因 B-action跑PCR，始终是一平的直线，好无助啊，求解？
        wx-share
        分享

        1 个回答

        user-title

        sean18

        有帮助
        首先，应该是RT-PCR，不是PT-PCR。RT-PCR就4个基本因素模板、引物、PCR试剂及PCR条件。曲线一直都是平的，一点都没有，非常可能的一点是你的realtime PCR仪设置出问题了，滤片模式选择错误。
        ad image
        ad image

        相关产品推荐

        抗体法热启动DNA 聚合酶，EnzymoPure™，阿拉丁

        抗体法热启动DNA 聚合酶，EnzymoPure™，阿拉丁

        ￥7415.90

        AMV逆转录酶，EnzymoPure™, solution, ＞50 units/μg protein, suitable for RT-qPCR, suitable for RT-PCR，阿拉丁

        AMV逆转录酶，EnzymoPure™, solution, ＞50 units/μg protein, suitable for RT-qPCR, suitable for RT-PCR，阿拉丁

        ￥2574.90

        逆转录酶：PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase

        逆转录酶：PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase

        ￥400

        化学法热启动DNA 聚合酶，EnzymoPure™，阿拉丁

        化学法热启动DNA 聚合酶，EnzymoPure™，阿拉丁

        ￥3707.90

        大肠杆菌 Poly(A) 聚合酶，医药级, PharmPure™，阿拉丁

        大肠杆菌 Poly(A) 聚合酶，医药级, PharmPure™，阿拉丁

        ￥1389.90

        相关问答

        问

        RT-PCR引物是从文章中找还是自己设计？

        6 回答 7577 围观
        2024-07-30

        问

        real-time PCR 与 reverse-transcription PCR 有什么区别？

        5 回答 13427 围观
        2019-11-04

        问

        关于内参，究竟如何加？

        6 回答 9667 围观
        1970-01-01

        相关方法

        RT-PCR技术

        RT-PCR实验步骤

        PCR 反应体系与反应条件、Taq 酶的选择、循环参数的设定

        推荐阅读

        PT-PCR

        【原创】两步法高分辨溶解曲线（HRM）SNP分型

        ELISA夹心法和竞争法在Excel中拟和曲线

        无忧采购 轻松科研

        无忧采购 轻松科研

        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序