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    定量PCR的扩增曲线不平滑是为什么？

    相关实验：实时荧光定量 PCR（realtime PCR）

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    p88773095

    我跑定量的时候，怎么扩增曲线老是跑出折线呢，不是平滑的线，这是什么原因呢，求各位高手解答啊
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    3 个回答

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    gjh731

    有帮助
    1，体系不稳定，加大体系，2，如果是国产试剂的话可能这种现象算正常的，因为每次循环完后读荧光时，国产的染料不一定每次都结合的到DNA上，因此即使扩增出片的，也可能因为染料无法结合到DNA导致荧光值上下波动。3，引物扩增效率不高，非特异性不强，4，延伸出问题，可以考虑72度延伸时间增长，
    user-title

    苏格兰白草莓

    有帮助
    如果怀疑染料问题，你可以试试EVA GREEN饱和染料，要比SYBR GREEN精确很多，不过很贵哈，要是做一般的mRNA基因表达差异分析大可不必使用EVA GREEN
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    yanyh123

    有帮助
    参比染料浓度太低
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