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PCR条带弥散,求大佬们应该怎么解决
且行且尽力
可以看看模版是否降解,如果降解重新提取。实验可以设置阴性对照和阳性对照,这样可看出是体系的问题,还是pcr条件的问题。若阳性对照有目的条带则说明,引物,体系,条件没有太大问题,可能是模版含有某些抑制因素,镁离子和退火温度等可以进行相应的调整
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问
qPCR跑胶,探针法的条带跑出来比较奇怪
土井挞克树
1.制胶不平2.上样的量太多而且跑胶时间不充足的可能,这种场合容易观察到一些DNA没有到位,于是看着有点拖扯的中间状态。3.因为你没有提及跑胶电压和时间,所以目前暂时来说,你可以试试可以稍微把电压降低,然后延长10分钟左右看看。
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问
反义链能设计引物吗?
huarenqiang5
你的这个情况能用模版链(反义链)来设计引物
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问
神经外科,杂志要求补充多因素分析~
huarenqiang5
一般发表都需要指导老师点评什么的才能发表,你可以另外找个指导老师帮忙点评也可以
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问
中国实用护理杂志,定稿会
huarenqiang5
定稿会会根据文章内容等方面进行讨论最终确定是否收录,可以打电话咨询呀,他不会只是因为打电话而退稿,主要是根据文章质量来确定的
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问
为什么要求纯度很高的DNA才能作为PCR的模板?
大草原的小灰驴
减少DNA模板的非特异性扩增,得到特异性比较高的PCR产物,减少抑制PCR反应的物质,防止产物被降解或者形成二聚体。
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问
ABI7500机器按了关机键后为什么关不了,没反应,急死了
balalaLy
偶尔会有死机的情况,只能强行关机重启。
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问
单标记荧光引物的连接方式有什么?在进行实时荧光定量扩增时(用引物单标不用荧光染料)能进行基因分型吗?
徐彩云6
在进行实时荧光定量扩增时当然能进行基因分型
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问
哪位大佬能帮我看看下图是什么原因啊?几个月前跑过是正常的,我接手了再跑每次都这个样。😭
juyue2010
程序设置问题体,参比染料选对了吗?
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问
排枪被污染怎样消杀?
senfeifu
要区分什么牌子的排枪吧,说明书有描述的。有些可以整只高温灭菌就直接高温消杀;如果说明书说只需取下来前面部位进行高温消杀那就只能取下来部分;【高温消杀后,如果有包括消杀活塞的,还要加硅油润滑,重新密封性测试】不能高温消杀的部位只能酒精消毒,纯水擦净(消毒液也可以其他试剂,但是要甄别不能伤害,或者不能腐蚀到 内外部的配件)。
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问
请问谁能解答为什么qpcr标曲离高浓度近的两个点曲线分不开,是为什么?
此用户已注销
有没有考虑过污染的问题?浓度梯度分曲线分不开可能因为稀释的问题,背景值高很有可能是染料污染或核酸污染
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问
pcr跑出来为什么是这样的
此用户已注销
一种是模板浓度太高,一种是引物特异性不好。
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问
求助🆘!
此用户已注销
一、参考文献的类型以单字母方式标识,具体如下: J—期刊文章 D—学位论文 C—论文集 M—专著 N——报纸文章 R——报告 不属于上述的文献类型,采用字母“Z”标识。 二、参考文献的格式及举例 1.期刊类参考文献格式 [序号]作者.篇名[J].刊名,出版年份,卷号(期号):起止页码. 2.学位论文参考文献格式 [序号]作者.篇名[D].出版地:保存者,出版年份:起始页码. 3.论文集参考文献格式
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问
胰岛素抵抗导致内皮损伤的细胞模型
paj12345
可以的,葡萄糖和果糖都属于常见的单糖,都能被细胞吸收利用,狭义的胰岛素抵抗是指葡萄糖利用率下降,类比果糖的利用率也会下降。
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问
荧光定量pcr操作过程中加混样第一枪有残留怎么应对
Dr_劉医生
个人经验就是换一把移液器,或者找厂家校正一下;不需要打第二枪,浪费时间而且容易污染。
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问
qRTPCR操作中加完混配后,枪头打不干净怎么办
dxy_z857if55
在整个操作过程中保持加样操作的一致性就可以,例如都把枪头内液体都打干净或都忽略枪头内残留即可。
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问
U6内参qpcr茎环法的前链和后链可以用加尾法逆转录的cdna做吗?
仁心郎中1
可以用加尾法逆转录的做cdna
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问
求助qpcr扩增曲线和熔解曲线问题
土井挞克树
考虑还是引物的问题1.建议降低引物浓度;2.适当增加模板量;3.重新设计引物
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问
请问细菌PCR该怎么操作
huarenqiang5
菌落PCR是直接把菌通过枪头或其他物品转移到PCR体系中,在94℃变性时,细菌一般会被煮裂解,基因组和质粒直接被释放出来作为模板。
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问
做qpcr时,为什么基因检测出了结果,但是内参都没有检测出来???
balalaLy
内参引物降解了?内参使用太久会失效的。
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