4 个回答
高山云初
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可能是酶切失败，内切酶特异度不足导致的
开水白菜zjl
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- 首先核对pcr产物内部序列是否存在双内切酶的酶切位点，如果存在需要考虑重新设计酶切位点或者更换连接方法
- 检测原载体是否酶切完全
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检查下PCR片段中有没有这两个酶切位点（酶切后跑个电泳看看切后的条带有没有变化）
可以将酶切后的PCR片段送测序，看看末端是不是真的没切开
土井挞克树
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最大的可能就是内切酶特异度不足，酶切失败
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