片段连接总是连不上是为什么？

dxyc42u

2023-05-21

有帮助

有可能是酶的问题，可以换个其他牌子的酶试一试

土井挞克树

2023-05-19

有帮助

可能是末端不匹配，先确定酶切位点没异常然后更换特异性的内切酶，确保切割末端无异常再重连

loveliufudan

2023-05-19

有帮助

可以尝试以下方法：

• 重新选择酶：尝试其他酶来切割和连接2bp的片段，确保酶能够在目标DNA序列中正常工作。

• 优化酶切条件：调整酶切反应的条件，例如酶的浓度、反应时间和缓冲液成分，以寻找最佳的切割效果。

• 改变连接方法：尝试不同的连接方法或试剂盒，以找到适合2bp片段连接的最佳条件。

• 检查DNA序列：仔细检查目标DNA序列，确保没有不利于酶切和连接的结构或序列重复。

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