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        EMSA只有DNA条带减少但不出现结合条带

        相关实验:凝胶迁移实验(EMSA)

        user-title

        dxy_npuohln2

        图片描述上图只用了纯化蛋白和DNA启动子片段,但无法检测到结合条带只有DNA带减少,求大佬救命!

        下图是添加了某种药品标样(蛋白和DNA种类不变),出现新的条带,请问这算是DNA与蛋白结合被遏制的剩余DNA条带还是DNA与蛋白的结合条带?图片描述

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        4 个回答

        user-title

        王元杰7S75

        有帮助

        您好,请问你后面解决了不出现结合带的问题了吗?

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        根据您提供的信息,EMSA实验中DNA条带减少但未出现结合条带的情况可能是由于实验条件的问题,例如蛋白质含量不足、缺乏必需的辅助因子、缺少足够的离子浓度等等。您可以尝试优化实验条件,例如增加蛋白质浓度、添加适当的辅助因子和离子等。

        至于第二张图中出现的新条带,需要您进一步确认是DNA与蛋白结合被遏制的剩余DNA条带还是DNA与蛋白的结合条带。您可以尝试在实验中添加适当的对照组,例如添加竞争性DNA片段,以确定这些条带是否与特定蛋白质的结合有关。如果这些条带是DNA与蛋白结合被遏制的剩余DNA条带,那么可能说明您的药品可以抑制蛋白质与DNA结合。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑是是DNA与蛋白的结合条带。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑DNA存在降解,因为从图中看不到结合的条带

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