在基因敲除后的细胞系，做目的基因过表达，表型没有恢复，为什么？

因为都是真核细胞，不需要做密码子优化。需要比较敲除前后蛋白表达量的差别，确认目的基因是否表达及其表达量，可能是因为过表达量低导致的变型无法恢复

基因敲除后就没有表达了，无法做过表达

可能是你用的过表达质粒的基因序列未经密码子优化，被敲除细胞系中的cas9在sgRNA引导下进行了切割，进而造成过表达不起作用