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在基因敲除后的细胞系,做目的基因过表达,表型没有恢复,为什么?

相关实验:全基因组CRISPR-Cas9基因敲除和转录激活筛选实验

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行而上学不行

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3 个回答

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简简单单的8872

有帮助

因为都是真核细胞,不需要做密码子优化。需要比较敲除前后蛋白表达量的差别,确认目的基因是否表达及其表达量,可能是因为过表达量低导致的变型无法恢复

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whilt-shirt

有帮助

基因敲除后就没有表达了,无法做过表达

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juyue2010

有帮助

可能是你用的过表达质粒的基因序列未经密码子优化,被敲除细胞系中的cas9在sgRNA引导下进行了切割,进而造成过表达不起作用

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