cDNA不同稀释度，溶解曲线差异很大是怎么回事？

可能原因是：

1、引物设计不够优化

2、引物浓度不佳

3、镁离子浓度过高

4、模板有基因组的污染

二倍稀释后出现双峰是正常的可以重复三次实验，如果都是同一结果那么就可以用。

可能是cDNA中含有的反转录成分太高，对qPCR造成影响

这是正常的，cDNA的稀释浓度不同，基因扩增的循环次数不同，成指数级增长，所以当3倍变成2倍，达到引物模板ct值就快，循环次数就会少，导致出现杂峰。