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        DNA Dot blot 求助

        相关实验:DNA 序列分析技术

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        sunset96

        最近要做5mC的dot blot,尝试了很多次,还是会出现点样交联后用亚甲基蓝染色后,有的圆很均匀,而有的圆会中间有一个小圆,不知道为什么,是dna样本有问题呢,还是点样方式有问题,想求助大佬图片描述

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        3 个回答

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        晓雨知春来

        有帮助

        有可能是点样方式或者是点样浓度的问题。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑是点样方式的问题,点样时候点样不正确可能造成局部DNA分解

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可能有以下几个原因:

        1. DNA样本质量:DNA样本的质量可能会影响dot blot实验的结果。如果DNA样本存在降解或者其他质量问题,可能会导致不均匀的染色结果。确保使用高质量的DNA样本,并且遵循适当的提取和处理方法。

        2. 染色剂浓度或染色时间:亚甲基蓝的浓度和染色时间可能会对染色结果产生影响。尝试优化亚甲基蓝的浓度和染色时间,以获得更均匀的染色结果。过高的浓度或过长的染色时间可能导致过度染色或不均匀染色。

        3. 点样方式:点样的方式可能会对染色结果产生影响。确保点样的过程中均匀且一致地施加样品,并且使用相同的处理步骤和条件。

        4. 点样浓度:点样中DNA的浓度可能会影响染色结果。尝试不同的DNA点样浓度,观察是否对染色结果有影响。

        5. 实验条件和操作:实验条件和操作也可能会对染色结果产生影响。确保实验过程中的温度、湿度和其他环境条件保持稳定,并且遵循准确的操作步骤和时间控制。

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