EMSA实验同样的探针，为何每次跑出来，下面free probe 亮度不一样

用同一次合成的探针，加同样的探针量，只是设置了不同量的蛋白梯度，按道理来讲，突变探针不结合，那么两次跑出来的free probe 应该亮度差不多，但是实际上却是有时候条带很明显，有时候很淡，造成这样情况会是什么原因呢？