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        分子克隆实验中出现很少或者没有转化子的原因是什么?

        相关实验:🔥 分子克隆技术

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        luckycan

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        4 个回答

        user-title

        迟C迟

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        考虑以下几个原因:

        1、抗生素有没有用错,检查载体抗性。

        2、转化过程是否成功,电激转化还是化学转化,转化条件是否正确。

        3、感受态细胞是否可用,有没有低温保存,是否在操作过程中失活,实在不行建议买商业化感受态细胞。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        如果你的引物啥的都没问题的话,可能就是酶切那一步出问题了,掌握不好酶切时间,或者酶有星号活性,导致切乱了。连接不好。还有就是感受态的状态,如果感受态不好了,也不行

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        可能是感受态转化效率低导致的。所以,在转化实验中要选择高效的感受态细胞。

        user-title

        未来9

        有帮助
        1.
        转化效率低:转化效率与外源DNA浓度之间在一定范围内成正比,当加入外源DNA的量过多或体积过大时,转化效率就会降低。
        2.
        这个操作应该在无菌条件下进行,注意防止被其他DNA污染,使转化子少。
        3.
        一般情况,进行转化时的质粒DNA溶液的体积,不宜超过感受态细胞体积的1/10。超过感受态细胞体积的十分之一则转化子较少。
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