实验问答21,857,592 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问Graphpad复式柱状图

晓雨知春来

建议点击柱状图并在数据点”选项中将缺失数据组的标记(标记点或数据标签)取消显示这样就不会留下空标记.

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问meta投稿

loveliufudan

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问Meta分析文献质量评估方法QUADAS 2

汤姆卜丽波

你这种情况既没有明确的连续性也没有时间界限，保险来看应该选择否

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问蛋白纯化

loveliufudan

原因可能有:1. 目标蛋白表达量太低,超过柱子的结合容量。可以优化诱导条件,提高表达量。2. 目标蛋白折叠不正确,His 标签被包埋在内部而难以接触。优化重组蛋白的表达条件。3. His 标签接入目标蛋白的位置不佳,影响了亲和性。可以重新设计表达载体的克隆位点。4. 洗脱条件强度过高,洗脱了大部分蛋白。可以调低咪唑浓度,甚至不加咪唑洗脱。5. 目标蛋白与其他蛋白形成复合体,间接影响了结合。可以变性

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问包涵体在离心时在上清还是沉淀部分？还是都有？

huarenqiang5

一般情况下离心时包涵体是在沉淀部分。

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问用TSS法制备rosetta感受态PH调过

晓雨知春来

在你这种情况下，PH调回到6.5对感受态制备没有什么影响。

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问hep3B细胞表达cccDNA和pg吗

晓雨知春来

一般来说hep3B细胞不会表达cccDNA和pg。

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问精子核DNA染色液（AO）法

晓雨知春来

普通的载玻片也可以使用，但是推荐使用防脱载玻片。

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问请问一下大佬们，做SSR分子标记，有什么推荐的书籍，论坛，网站吗？随便问一下，ssr引物在哪里可以买啊？

loveliufudan

以下是一些建议：1. 书籍： - "Microsatellites: Methods and Protocols" - 编辑：P. Daniele et al. - "Molecular Markers, Natural History, and Evolution" - 编辑：J. C. Avise et al. - "Microsatellites: Evolution and A

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问求一张在一个六孔板里细胞密度大概是2×10的6次方的图片

sswei

铺板密度要根据细胞类型决定，比如一般293T,6孔板要铺板4×105，如果是HELA,细胞比较大，就要铺大概1.6×105左右。如果你是要做质粒转染，铺板密度也和你要用的转染试剂有关，LIPO就要求细胞密度在转然的时候达到70％－90％以上，钙转就只要50％即可。

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问细胞膜仿生纳米粒子制备

huarenqiang5

可以使用溶胞法提取:这是一种简单、有效的细胞膜获得方法，其原理是使用溶胞酶溶解细胞，使细胞膜脱离细胞，从而获得细胞膜。溶胞法可以有效获得低粘度细胞膜，其结构和性质可以很好地控制，也可以有效保存细胞膜的复杂结构和性质，是一种理想的细胞膜获得方法。

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问兄弟们这个有什么问题啊为什么无带啊

dxyc42u

考虑引物设计的不好，重新设计下吧

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问用同源重组的方法构建载体，结果amp板上一个菌都没长

dxy_t3td6v30

1.可能是载体质粒没提好，或者说载体抗性可能搞错了，所以长不起来。2.AMP抗性的板子配错了，或者说板子配方不对，导致长不起来。3.如果是切开了的空载，有可能会不长。建议：1.利用未酶切的载体试试，看是否是板子抗性或者配方的问题导致不长，如果板子的抗性和配方没问题，应该会长满。2.利用已有的连接成功的质粒，做阳性对照，如果它能长起来，就说明是你同源重组没连上，如果它的也没长，说明板子有问题。

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问GST pull-down实验中，阴性对照GST蛋白怎么获得

sswei

GST融合蛋白纯化磁珠，通过磁珠偶联谷胱甘肽(GSH)，利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶之间酶和底物的特异性作用力，分离出带有GST标签的蛋白

3 回答989 围观

问小白发问，SSR设计引物为什么要设计多对引物啊，设计出来的多对引物是可以全基因组的所有SSR位点都扩出来，还是说只能扩出

晓雨知春来

可以把全基因组的所有SSR位点都扩出来。

3 回答666 围观

问为什么条带这么散，第四孔道的目的条带可以用去测序吗

dxy_xextz7w2

条带弥散的原因可能是样品有蛋白质或者其他污染，胶有问题或者引物特异性不好，条带很明显的话可以拿去测序

3 回答344 围观

问质粒提取浓度只有50ng/ul可以用于转染吗？

土井挞克树

可以的，如果效率不高可以少量多次的转染

4 回答6335 围观

问双酶切验证成功，但测序结果显示空载怎么回事？

dxy_mqg1dtg8

是不是两个酶切位点距离太近，或者是载体上其他地方还有这两个酶切位点

4 回答1807 围观

问GST pull-down 对照试验如何设计？

土井挞克树

一般对照都是采用gst成分保留在融合蛋白上，然后用gst结合在谷胱甘肽琼脂糖作为对照实验

3 回答910 围观

问单臂meta亚组间差异 P值是用什么方法计算的？t检验吗？

dxyc42u

是的，用的是t检验(ttest

3 回答818 围观

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