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科研学霸天团，48小时有问必答

问聚类分析和多重对应分析（MCA）

huarenqiang5

1.聚类通过把目标数据放入少数相对同源的组或“类”(cluster)里。分析表达数据。 (1)通过一系列的检测将待测的一组基因的变异标准化，然后成对比较线性协方差。 (2)通过把用最紧密关联的谱来放基因进行样本聚类，例如用简单的层级聚类(hierarchical clustering)方法。这种聚类亦可扩展到每个实验样本，利用一组基因总的线性相关进行聚类。 (3)多维

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问meta分析直接把发病率IRR 直接当成OR值进行比较

huarenqiang5

把发病率直接当成OR值进行比较肯定不合适。

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问求教:Meta分析数据合并

loveliufudan

在这种情况下，您需要将A文献中的亚组合并为一个整体亚组，然后将所有文献中相应的影响因素整体进行比较。您可以使用元回归（meta-regression）或子组分析（subgroup analysis）来探究这些亚组之间的异质性，进而确定是否可以将这些亚组合并为一个整体亚组。此外，您还可以使用敏感性分析（sensitivity analysis）来检验不同的合并方法是否对最终结果产生影响。需要注意的是

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问求问关于质粒转酵母的问题

huarenqiang5

考虑问题出在质粒上，首先需要对质粒进行电泳检测，电泳结果需为大小正确且明亮的条带；其次核对筛选培养基的选用和配制是否正确；排除上述因素，就需要复查酵母菌的外观气味是否正常，或者进行镜检。

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问求助（要质粒的信该）

龙大人驾到

先介绍自己的实验目的和背景，让对方了解你的研究方向和需要。表达你对对方实验室的研究工作的兴趣，如果你能提到对方实验室的相关研究，会让对方更愿意帮助你。

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问电镜分析

huarenqiang5

绿色和红色分别是溶酶体和蛋白颗粒。

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问碱性氨基酸转移到蓝藻与大肠杆菌上

土井挞克树

可能性不高，真菌与动物的转导通路没有共同性，动物的酶通常不适用于真菌。

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问连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态致死的原因？

loveliufudan

产物转化后感受态大肠杆菌死亡的原因可能有多种，包括连接体系的DNA浓度过高或过低、连接反应时间过长或过短、连接体系的酶和缓冲液质量不佳等等。针对您提供的实验细节，我建议您考虑以下几点改进：调整连接体系的DNA浓度：连接体系的DNA浓度是影响连接产物转化的关键因素之一。您可以尝试调整基因和质粒的加入体积，以调整连接体系的DNA浓度。如果浓度过高可能导致细胞感受态死亡，如果浓度过低则可能导致连接效率低

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问求助：多水平重复测量数据分析

huarenqiang5

这种情况可以使用非参数统计法进行分析。

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问co-IP/pre-clear/磁珠封闭

loveliufudan

对于内源co-IP实验，如果预处理（pre-clearing）过的上清液与抗体过夜孵育，第二天加磁珠时最好使用已经用BSA封闭过的磁珠，以减少非特异性结合。BSA的浓度可以根据具体实验需要来定，一般建议使用1% BSA。封闭时间通常为30分钟至1小时，不需要太长时间。至于是否必须用封闭过的磁珠，这取决于实验的需要和具体情况。如果非特异性结合的情况比较严重，使用封闭过的磁珠可以降低干扰信号的产生，但

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问扫描电镜

bamboopiggy

用酒精处理无菌以后可以直接放到培养皿里，让细胞自然沉降上去

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问小鼠乳腺癌肺组织，救助，这是坏死了还是血栓？？

bamboopiggy

你养了多久的小鼠？会不会是乳腺肿瘤的转移？

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问磁珠法植物DNA提取试剂盒提取的核酸，纯度只有1.1左右，是什么原因？应该如何调整？

huarenqiang5

考虑以下原因： (1)裂解不充分； (2)微球分散性不好； (3)微球吸附能力太强。（4）磁珠吸附能力较弱； (5)磁珠洗脱效率较弱； (6)提取试剂(pH、盐、醇)与磁珠不匹配。建议按以下几点进行优化：（1)优化试剂裂解液配方； (2)筛选合适粒径及表面的磁珠； (3)磁珠表面钝化处理。 (4)改变表面基团种类及密度； (5)减少干燥时间、加热洗脱

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问用试剂盒提取蝗虫基因组DNA，提取完之后跑胶，条带不怎么亮，有可能是裂解的时间不够，但是加样孔处很亮，想问一下是什么原因?

sswei

一般是样品处理或者配胶的时候不注意，混入了一些内切酶，或是电泳温度高，导致核酸降解，尤其是跑rna电泳，很容易这样。建议用新胶，重新跑一次，样品用醋酸铵重新纯化，电泳槽用缓冲液冲洗多次再用。另外可以在电泳槽周围放冰，降低电泳温度，并适当调低电压，因为高温对核酸降解也有促进作用。

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问HLA高分序列确定

sswei

IMGT/HLA数据库中查找“HLA-A02:01”，然后选择一个具有最高分数的亚型来进行匹配，因此有利于研究的顺利进行，获得正确结果。

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问细胞电镜求分析

小锦鲤木子

图片在哪里呀？？？建议到教材中好好学学细胞器

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问IP 磁珠和琼脂糖

loveliufudan

一般来说，抗体可以偶联在磁珠表面进行免疫磁珠层析等实验。但是，不同类型的抗体偶联到磁珠上的适用性可能会有所不同，因此最好在实验前进行一定的验证。建议可以先购买一些小规模的磁珠进行实验验证，或者咨询厂家或其他有经验的专业人士的建议。同时，需要注意抗体的偶联条件，如pH值、交联剂、偶联时间等，这些条件对于不同类型的抗体可能会有差异，需要进行优化和确定。

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问生物合成基因簇

huarenqiang5

化合物的生物合成基因簇可以是生物合成途径中参与的反应的酶。

4 回答506 围观

问如何做mRNA变性胶

土井挞克树

变性聚丙烯酰胺凝胶，是分子生物学常用技术之一，凝胶的灌制比水平电泳槽凝胶灌制困难，漏胶和产生气泡常在所难免，需经过反复实践才能掌握其灌制技巧。

4 回答382 围观

问想说明某因子促进病毒复制从而致瘤有关研究，转染和接毒顺序是啥样？

土井挞克树

在病毒感染的前提下做过转染成功率高

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