实验问答21,888,881 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问单细胞测序结果分析

土井挞克树

结合物和治疗方法的匹配图，有专门的生成软件

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问chip磁珠法

loveliufudan

在CHIP（Chromatin Immunoprecipitation）磁珠法后续进行SEA（Sequential Enrichment Analysis）时，可以尝试使用磁力架来实现磁珠的分离和洗涤步骤。磁力架是专门设计用于与磁珠结合并在磁场中进行分离的设备，能够方便快捷地收集和清除磁珠，减少操作时间和液体处理步骤。如果没有磁力架，理论上可以尝试使用磁铁来替代。然而，需要注意以下几点： 1. 磁

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问pcr提取完的基因总突变，用了高保真酶也没用，有时候转化进大肠杆菌测序得到的基因序列彻底比对不上。

是TTT

可能是其他基因也共用这个引物序列，你可以用测序结果匹配一下是不是其他相似基因的序列

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问核酸提取试剂盒(磁珠法)，一不小心放在-20度了，本来应该放在4度的，会影响检测结果吗？

是TTT

慢慢复温就行，可以拿出来放在4℃融解

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问如何学习孟德尔随机化

dxyc42u

可以先从机器学习开始，一边看教程一边学习

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问求助，基于组的轨迹（GBTM）与潜类别混合模型（LCMM）有什么区别吗？

loveliufudan

1. LCMM（Latent Class Mixed Models）：LCMM是R中的一个包，用于纵向数据的潜在类别混合模型分析。它基于潜在类别模型（Latent Class Model）和混合效应模型（Mixed Effects Model），可以识别出数据中的潜在类别并对类别之间的变化进行建模。LCMM可以用于探索数据中的群体结构、描述不同类别的特征，以及研究潜在类别随时间的变化。2. PRO

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问Revman与危险因素的meta

loveliufudan

在RevMan软件中进行危险因素的meta分析，您可以按照以下步骤进行操作： 1. 准备数据：将提取的病例对照研究的OR值和95%置信区间（CI）整理为一个数据表格，确保每个研究的数据按行排列，并包括相关的研究特征（如作者、年份等）。 2. 打开RevMan：打开RevMan软件并创建一个新的meta分析项目。 3. 导入数据：在RevMan软件的”Data”标签页中，选择导入数据的选项，将准备好

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问meta分析

dxy_akqp9v7

多检索几个数据库：EE+，dynamed，Ovid，uptodate……都试试，实在没有，就重新从别的角度考虑主题。

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问临床试验注册求指导

loveliufudan

在发表临床试验协议之前注册试验是一个良好的做法，可以增加研究的透明度和可信度。关于您提到的基金编号要求，这通常是在注册平台上的一个选项，用于记录研究是否获得了特定的基金支持。如果您的研究暂时还没有申请到基金，您仍然可以注册临床试验。在注册试验时，您可以选择相应的选项表明研究目前没有获得基金支持或者选择未知/待定。这并不会影响您注册试验或发表协议的能力。重要的是提供尽可能详细和准确的信息，以确保注册

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问【求助】关于肠激酶对C末端序列识别酶切的问题

loveliufudan

如果您的目的蛋白的C端刚好存在一个肠激酶识别位点（DDDDK），但该位点后是终止密码子，即没有其他氨基酸残基，使用肠激酶切除N端的标签可能会对您的目的蛋白产生影响。一般情况下，肠激酶会识别并切除蛋白质N端的标签，但如果目的蛋白的C端没有足够的氨基酸残基，切除标签后可能会导致蛋白质的不稳定性、不折叠或降解。因此，在这种情况下，使用肠激酶切除N端的标签可能不适合。您可以考虑以下几个选择： 1. 考虑使

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问质粒提取曲线不对

loveliufudan

可能有以下几个原因： 1. 污染：试剂盒中的试剂或试样可能受到污染，导致曲线异常。确保在操作过程中避免污染源的引入，并且按照试剂盒说明书的要求进行操作。 2. 样品质量：样品中可能存在其他物质，如蛋白质、RNA、酶或其他杂质，这些物质可能会影响吸光度测量结果。尽量减少样品中的污染物，如通过正确的离心步骤去除细胞残渣。 3. 溶液pH值：质粒提取试剂盒中使用的缓冲液的pH值可能会影响吸光度测量结果。

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问SCI中不同物种同一基因序列对比，如何做？

loveliufudan

在比较不同物种的同一基因序列时，您可以使用序列比对的方法来进行分析。以下是一种常见的序列比对方法： 1. 收集基因序列：从不同物种的数据库或相关文献中获取您感兴趣的基因序列。确保收集的序列来自可靠的来源，并且包含相同的基因或转录本。 2. 序列比对：使用序列比对工具进行比对，如NCBI BLAST、Clustal Omega或MUSCLE等。这些工具可以帮助您将不同物种的基因序列进行比对，并显示它

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问请问 5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit 产品中的Blunt载体连接3Kb的片段，为什么连接不上?

土井挞克树

考虑是引物的问题，引物不匹配可能性大，更换一款引物后重连。

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问单倍型怎么和性状关联分析

dxyc42u

纯合子与杂合子应该区别对待，不能只看AG碱基

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问片段连接总是连不上是为什么？

dxyc42u

有可能是酶的问题，可以换个其他牌子的酶试一试

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问感受态效率上不去和那些原因有关呢？

sswei

①菌液OD值偏大或偏小②原始菌株不好③试剂超纯程度不够④操作时，对菌体伤害过大。影响感受态效率的最重要的因素就是:菌的状态。

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问荧光定量PCR仪的通道数是什么意思？

loveliufudan

对于水生动物病原检测，可以选择同时检测多个病原或提高单个病原的准确度，具体取决于你的研究目的和实验需求。1. 同时检测多个病原：如果你关注多个病原的存在与传播情况，同时检测多个病原可以提供更全面的信息。这可以通过使用多重PCR或基于核酸测序的方法来实现，其中使用多个引物或多个探针，分别特异性地检测不同的病原。这样可以在单个样品中同时检测多个病原，提高检测效率和节省时间。2. 提高单个病原的准确度：

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问目的基因对下游影响

土井挞克树

考虑目的基因对下游信号有双重调节，建议固定实验条件后先探索一条通路。

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问为什么电泳时候marker最后一条带特别亮

loveliufudan

在电泳过程中，如果marker的最后一条带特别亮的原因可能有以下几个可能性：1. 过度加载：过多的marker在电泳过程中会导致浓缩效应，使最后一条带出现特别亮的情况。确保在加载样品时按照建议的浓度和体积进行操作，避免过度加载。2. 原始浓度差异：不同分子量的marker通常以不同的浓度提供。如果最后一条带对应的分子量标记在marker溶液中的初始浓度较高，那么在电泳过程中会表现为特别亮的带。3.

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问请问下，在高效液相检测维生素C，总是出现平行进样两针峰面积差异大？

土井挞克树

可能是基线不一致的原因，建议把基线调平后再平行进样。

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