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科研学霸天团，48小时有问必答

问慢病毒转染后，过表达组目的基因的mRNA相对表达量是对照组的几百倍，而空载组却比对照组少得多？

dxyc42u

有没有验证功能，可以试着做下功能，如果功能有明显差异就不用管空载组与对照组的表达

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问肿瘤细胞与小鼠脾脏源CD8T细胞共培养

dxyc42u

普通的细胞能做出，但是效果不好

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问用香豆素6染纳米颗粒后在水中透析的操作方法

loveliufudan

1.将香豆素6溶于DMF配制5 mg/mL有机相溶液。将载体材料（如PLGA或HPMC）溶于水或HBSS配制一定浓度的水相溶液。2.用乳化-溶剂挥发法制备香豆素6纳米颗粒，即将有机溶液加入水相溶液中，在冰水浴条件下，用超声波细胞粉碎仪间断超声数分钟后，转移至低浓度的PVA挥去有机溶剂，得到香豆素6纳米颗粒。3.用葡聚糖凝胶柱将载香豆素6的纳米颗粒和游离香豆素6分离，即取溶胀24小时以上的Sepha

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问大家好，我现在正在做化学感受蛋白的荧光竞争结合实验，蛋白和探针结合曲线测不饱和

loveliufudan

以下是一些应该注意的细节： 1. 样品处理：确保你的样品（蛋白和探针）的纯度和质量是高的，以避免其他因素对实验结果的干扰。 2. 缓冲液选择：选择适当的缓冲液来稳定蛋白和探针的性质，并确保缓冲液不会干扰荧光信号的测量。 3. 实验温度：控制实验温度的一致性，因为温度的变化可能会影响蛋白和探针的结合性能。 4. 探针浓度选择：根据你的实验目的和预期的结合曲线测量范围，选择适当的探针浓度范围。确保在浓

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问为什么用DNS法测木聚糖酶活性的时候，我们是煮沸后再加的酒石酸钾钠啊，酒石酸钾钠的作用到底是什么？

loveliufudan

酒石酸钾钠在DNS法测定木聚糖酶活性时，起到以下作用： 1. 稀释酸性：酒石酸钾钠在酸性条件下将DNS溶液稀释为合适的浓度，以便对产生的还原糖进行准确测量。稀释后的DNS溶液可以更好地与还原糖反应，形成可测量的颜色。 2. 稳定性：酒石酸钾钠有助于稳定DNS溶液的化学性质。它可以防止DNS溶液在加热过程中发生分解或退色，从而保证测定结果的准确性。 3. pH调节：酒石酸钾钠可以调节溶液的pH值。D

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问KH2PO4在毕赤酵母发酵抗菌肽的作用？

loveliufudan

KH2PO4在毕赤酵母发酵抗菌肽的过程中可能发挥以下作用： 1. 营养源：KH2PO4可以作为毕赤酵母发酵培养基中的磷源和钾源。磷是生物体中的重要元素，对生物体的生长和代谢过程至关重要。钾在细胞内起着维持离子平衡和调节酶活性的作用。因此，KH2PO4提供了毕赤酵母在发酵过程中所需的营养元素。 2. pH调节：KH2PO4可以在培养基中起到调节pH的作用。根据所需的发酵条件，添加适量的KH2PO4可

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问硫酸铵沉淀法适合用于分离什么蛋白质呢？

loveliufudan

从海产品中提取金属结合蛋白的方法与一般蛋白质的提取方法可以有所不同。在你所提到的方法中，缓冲液可能是用于提取金属结合蛋白的特定试剂，而非一般的蛋白质提取试剂。硫酸铵沉淀是一种常用的蛋白质分离和富集方法。在这个实验中，硫酸铵被用来沉淀目标金属结合蛋白，从而实现与其他非目标蛋白的分离。硫酸铵沉淀法适用于许多蛋白质，因为它可以根据蛋白质的溶解度和盐度效应进行选择性沉淀。这种方法可以帮助去除一些不特异的蛋

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问用酶冻干粉500U怎么配制160U/L的酶溶液

loveliufudan

标明为500U的3-磷酸甘油酸脱氢酶，这表示每瓶中含有500个酶活性单位（U）的酶。要配制160U/L的酶溶液，你可以按照以下步骤进行： 1. 首先，确定你需要制备的总体积。假设你需要制备100 mL的酶溶液。 2. 计算所需的酶量。根据所需浓度和总体积，可以使用以下公式计算所需的酶量：所需酶量（U）= 目标浓度（U/L） × 总体积（L）。在这种情况下，所需酶量为160U/L × 0.1L =

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问动物先造模后给药，或边造模边给药两种方法的原理及优缺点

loveliufudan

动物先造模后给药和边造模边给药是两种常见的实验方法，其原理和优缺点如下： 1. 先造模后给药： • 原理：在动物建立疾病或条件模型之后，再进行药物给予。这种方法可确保模型的稳定性和一致性，然后通过给药来研究治疗效果。 • 优点： • 模型建立后可以仔细评估疾病状态，确保治疗前的一致性。 • 可以评估治疗对已形成疾病的影响，更贴近真实临床情况。 • 缺点： • 模型建立后可能需要一定的时间来发展疾病

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问Sds-page凝胶电泳底部防漏密封装置的制作方法

是TTT

密封防漏可以使用甘油，在玻璃板底部涂抹一圈还可以用塑封膜封住玻璃板底部

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问AKTA蛋白纯化仪插入命令logbook那不显示，曲线图也不显示，最上边continue、end不能呈灰色。哪位大神帮忙分析下

土井挞克树

把软件退出重进，如果还是同样的操作建议更新插件，考虑是插件损坏

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问斑马鱼在脑室注射时试剂无法完全注入脑中，该如何解决？

feixue7758527w

我觉得你可以用注射泵看看，至少我在小白鼠身上用的不错的，你可以试试。

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问将血浆冷冻干燥，制成粉剂需要什么实验条件才能实现？大概的实验条件范围？温度、时间等

是TTT

血浆进行预冻。血浆置于-80℃冰箱或液氮中，使之冰冻结实，时间越长冻干效果越好。预冻的原因是样品在固态（结冰状态）下才能冻干。使用真空冷冻干燥机进行冻干。按照一般冷冻干燥程序设置干燥步骤，温度需要在-40℃或者更低，时间需要一至两天。

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问衣原体培养需要注意事项

是TTT

因为衣原体多缺乏主动穿入组织细胞能力，所以分离培养衣原体需要:接种有衣原体材料的细胞培养管需离心沉淀以促使衣原体穿入细胞或者在细胞培养管中加入适量的二乙氨基葡聚糖(DEAE-dextran)，提高衣原体吸细胞的能力，使它易穿入细胞进行繁殖。衣原体分离培养需要在二级以上实验室操作。

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问求问各位前辈斑马鱼注射用针问题！

土井挞克树

可以用凝胶固定斑马鱼，然后选用小口径针进行注射

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问骨骼肌组织病理为什么间隙变大

loveliufudan

骨骼肌组织的间隙增大可以有多种原因，以下是一些可能的解释： 1. 肌纤维退变：肌纤维退变是一种肌肉疾病，其中肌肉纤维逐渐变得异常或丧失，导致组织的结构和功能受损。在肌纤维退变过程中，肌纤维可能变薄或丧失，导致组织间隙增大。 2. 细胞水肿：细胞水肿是由于细胞内液体积的增加而引起的细胞膨胀。当骨骼肌组织发生细胞水肿时，细胞内的液体聚集，导致组织间隙增大。 3. 炎症反应：骨骼肌组织的炎症反应可能导致

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问病毒攻毒后1.5小时，细胞全部悬浮，是病毒液浓度太高了吗，还是什么原因，怎么办

loveliufudan

当细胞在病毒攻毒后短时间内全部悬浮，有以下几种可能的原因： 1. 细胞溶解/破裂：高浓度的病毒感染可能导致细胞溶解或破裂，从而导致细胞完全悬浮。这可能是由于病毒感染引起的细胞损伤和破坏。 2. 细胞凋亡：某些病毒感染可能导致细胞凋亡（程序性细胞死亡），从而使细胞脱离底物并悬浮在培养基中。这可能是病毒感染对细胞的特定效应之一。 3. 病毒复制和释放：高浓度的病毒攻毒可能导致病毒在细胞内大量复制和积累

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问中国心血管病研究杂志是停刊了吗

loveliufudan

不一定是停刊，还有一种可能是更名了。

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问scientific reports 投稿问题

loveliufudan

有以下几种可能的原因： 1. 系统更新延迟：投稿系统可能存在延迟更新进度信息的情况。这可能是因为系统需要一些时间来处理和更新投稿信息。您可以稍后再查看，看是否有更新。 2. 技术问题：有时候，投稿系统可能会出现技术问题，导致进度信息无法显示。这可能是临时性的问题，您可以稍后再尝试查看。 3. 投稿状态问题：投稿状态为空白可能表示您的投稿尚未完成或进入下一个阶段。可能需要一些时间来进行质量检查和审稿

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问STATA做meta,出现以下该怎么做？

loveliufudan

错误信息显示效应大小和置信区间的顺序无效。这可能是由于数据输入的顺序不正确导致的。请尝试按照正确的顺序输入变量。在执行meta分析之前，确保您按照以下顺序正确地输入变量： 1. 效应大小（effect size）：通常表示为log odds ratio（对数几率比）或其他适当的效应度量。在您的情况下，使用变量名Inor。 2. 下限置信区间（lower limit of confidence in

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