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实验问答23,812,751 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

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问过氧化氢诱导建模应该怎么选购呢？

loveliufudan

一般来说，购买过氧化氢应该通过专业的实验室试剂供应商或化学品供应商进行购买，这些供应商提供的过氧化氢通常符合实验室安全标准，但是去药店买“双氧水”也是可行的。

5 回答690 围观

问小鼠鼠源性胰腺癌细胞皮下瘤，放疗增敏给多少剂量合适

feixue7758527w

放疗增敏剂一般都是按体重计算的，有的是5mg/kg，有的是870mg/kg，具体要看你用什么放疗增敏的。

3 回答594 围观

问pH 4.5的乙酸怎么配制？

sswei

如果用冰醋酸与氢氧化钠配制。PH=PKa-lg[HAc]/[Ac-]4.5=4.75-lg[HAc]/[Ac-]lg[HAc]/[Ac-]=4.75-4.5=0.25[HAc]/[Ac-]=1.78/1需要冰醋酸的质量为0.1×1.78/2.78×60=3.8克需要氢氧化钠的质量为0.1×1/2.78×40=1.4克将两者与水配制成一升溶液即可。

3 回答1722 围观

问求助，BAF3悬浮细胞系进行质粒转染用啥转染试剂成功率高啊。

烧伤科常医生

我的经验是使用磷脂体转染试剂成功率能高一些

4 回答465 围观

问测定海参中的钒含量采用哪种方法比较好

土井挞克树

石墨炉原子吸收的方法比较精确，ICP-MS相对精准性差一些

4 回答416 围观

问求助🆘测定某种细菌对动物的半数致死量，应该怎么分组，怎么设置浓度梯度，每组的实验动物最少得多少只？

dxyc42u

分组就设置为正常对照和感染组，浓度可以参考文献中的，每组有四五只动物就行

4 回答1032 围观

问咨询一下广大的网友，我接下来需要在秀丽隐杆线虫体内过表达自身的miRNA，如何选择载体？

dxyc42u

选择构建过表达质粒就可以了。。

4 回答403 围观

问蛋白质纯化洗脱中洗脱液的梯度如何操作

loveliufudan

“从0到400mM的递增NaCl溶液”的意思是用NaCl浓度从0mM开始，逐步增加至400mM的一系列NaCl溶液进行洗脱。这个操作通常是为了逐步改变柱子环境的离子强度，从而分级洗脱在离子交换柱上不同程度吸附的蛋白质。通常的方法是，首先准备一些NaCl溶液，如0mM、50mM、100mM、200mM、300mM、400mM等。这些溶液可以根据实际需要和实验要求准备。然后，你可以首先使用0mM的Na

4 回答1868 围观

问请问透射电镜观察细胞线粒体，自噬小体前的收样准备工作时，可以用胰酶消化法收集细胞样本吗？胰酶会破坏细胞超微结构吗？

loveliufudan

为了尽量保护细胞的超微结构，在进行透射电镜样本的制备时，一般推荐采用更为温和的细胞分离方法，比如机械搅拌或使用酶混合物如胰酶和EDTA的低浓度溶液。并且要尽量缩短酶的作用时间，避免对细胞的超微结构产生破坏。总的来说，可以用胰酶进行细胞分离，但是需要严格控制胰酶的作用条件，以保护细胞内部的超微结构。同时，在收集细胞样本后，需要迅速进行固定和包埋等后续步骤，以防止细胞结构的进一步破坏。

4 回答575 围观

问求完整的DASH饮食评分表，以及计分原则？

loveliufudan

关于DASH饮食的评分表，不同的研究中可能会有所差异，因为评分可能会根据研究的特定目标或人群进行调整。但基本的原理是根据个体的食品类别和摄入量进行评分，与DASH饮食指南的建议相符者得分更高。下面是一个基本的DASH饮食评分示例（每日摄入）： 1. 全谷类：每日6-8份，每份对应1分。 2. 蔬菜：每日4-5份，每份对应1分。 3. 水果：每日4-5份，每份对应1分。 4. 低脂奶制品：每日2-3

3 回答4003 围观

问DEAE Sepharose fast 离子交换柱上样前是否需要过0.45μm的膜

loveliufudan

DEAE Sepharose Fast Flow是一种阳离子交换色谱介质，常用于蛋白质纯化。其颗粒大小通常在90-165微米范围内，因此理论上，对样品进行0.45微米或0.22微米的过滤并不会影响到色谱柱的填充物。过滤样品的目的主要是为了去除可能阻塞柱的大颗粒物质，比如细胞碎片或未溶解的沉淀物。如果你的样品已经通过其他方法（例如离心或超速离心）去除了这些大颗粒物质，那么可能不需要再进行过滤。但是，

4 回答710 围观

问蛋白质分离纯化过程中各种缓冲液如何配制

loveliufudan

这些缓冲液的配制主要涉及到以下化学物质：Tris，盐酸，NaCl，EDTA，NaH2PO4，PMSF和protease inhibitor cocktail。下面是每种缓冲液的具体配制方法： 1. 匀浆缓冲液：先在适当体积的去离子水中溶解适量的Tris和NaCl，再加入EDTA。之后使用盐酸或者氢氧化钠调整pH到8.0。所有物质应配成最终浓度为200 mM Tris-HCl，150 mM NaCl

3 回答4137 围观

问GC-MS前处理怎么判断是否需要衍生

loveliufudan

判断样品是否需要衍生化的关键因素包括： 1. 样品的挥发性：如果样品中的化合物不能在GC的工作条件下挥发，则需要进行衍生化。这通常涉及到极性、热稳定性和分子大小的问题。 2. 样品的化学稳定性：如果样品中的化合物在GC的工作条件下会分解或反应，则可能需要进行衍生化以提高其稳定性。 3. 需要提高化合物的检测灵敏度或选择性：通过衍生化，可以改变化合物的化学性质，提高其在GC-MS中的检测灵敏度或选择

3 回答812 围观

问Protocol 里面写的PBS清洗细胞的时候，是每次都需要重新离心细胞并吹匀吗？

loveliufudan

在很多情况下，使用PBS洗涤后，会通过吸取去除PBS，而不需要再进行离心。然后加入新的缓冲液或试剂直接进行下一步的实验操作。这样操作的原因是，频繁的离心可能会对细胞造成压力，甚至可能导致细胞损伤。但在某些情况下，例如在需要完全清洗掉PBS，或者需要收集细胞进行下一步实验时，你可能需要在PBS洗涤后进行离心，并用吹管吹匀悬浮细胞。

3 回答1230 围观

问检测细胞的GFP绿色荧光表达，样品需要计数吗？

烧伤科常医生

可以取一部分细胞进行流式，细胞密度不同会有影响

4 回答332 围观

问用种子液提质粒的时候没有条带

dxyc42u

很可能是质粒没有表达目的蛋白。

4 回答702 围观

问请问哪里有培训ISO15189注册内审员的培训会？

dxyc42u

SO15189注册内审员培训会我们医院检验科搞的

3 回答377 围观

问如果学校的流式细胞仪没有PI 的荧光通道的话，可以用PE通道来代替吗？

loveliufudan

尽管PE通道可能在理论上能检测到一定程度的PI信号，但由于光谱特性不完全匹配，因此检测效果可能不理想。更关键的问题是，如果你同时使用PE标记的抗体和PI，那么在PE通道上就会发生荧光补偿问题，这可能会使你的结果难以解读。在这种情况下，你需要找一个和PI光谱匹配并且不会和你其他荧光标签产生干扰的染料，比如7-AAD。

4 回答4968 围观

问可以用4%的多聚甲醛来固定细胞吗？

烧伤科常医生

可以用4%的多聚甲醛来固定细胞

5 回答7510 围观

问临界点干燥样本大小要求

烧伤科常医生

选取组织块长宽小于十毫米，高度小于五毫米

4 回答252 围观

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