实验问答22,029,163 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问MTT实验细胞铺96孔板密度一般多少

sswei

在96孔板中加200ul比较合适，细胞的密度一般取1undefined5。正好合适。

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问请问人肺炎支原体培养怎样做才能做细胞之间不相互感染

huarenqiang5

首先保持周围环境无菌，其次主要严格按照无菌技术进行操作一般不会相互感染。

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问冰冻切片切完后，脑片可以放在4度保存多久啊

sswei

做了冰冻切片如暂时不染色观察，如果第二天做，可以直接放在4℃冰箱保存。如果想保存更久，用冷丙酮固定10分钟，放-20℃保存。染色前，从冰箱取出后在4℃复温20分钟，再室温复温15分钟即可。

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问投稿需要查重降重吗？

sswei

如果用户在普通期刊上发表论文，重复检查率的要求将在30％以内，整体难度仍然相对较小。例如，如果核心期刊上发表的论文重复检查，则论文重复检查难度较大。一般来说，我们应该确保论文的查重率低于15％。当许多顶级期刊发表论文时，论文查重检测应低于5％。

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问两种药物联合用药浓度如何获得？

dxy_mqg1dtg8

联合用药的药物浓度需要考虑两种药物的药代动力学参数，如药物的吸收、分布、代谢和排泄等。一般来说，联合用药的药物浓度需要进行药代动力学模拟，通过计算机模型来预测药物浓度的变化。这个过程需要考虑药物的各种药代动力学参数，如药物的半衰期、药物在体内的分布、药物的清除速率等等。药代动力学模拟可以帮助优化药物剂量和给药方案，从而达到更好的治疗效果。药代动力学模拟可以使用专业的药物动力学软件，如WinNonl

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问测CAT时，是用煮死的酶用来校零，测对应活着的酶的吸光度吗？另外，煮死的酶在测定时显示的吸光度不稳定，一直在变，可能是什么原因呢？

dxy_mqg1dtg8

可能是由于样品的分解或者氧化等因素导致的。为了避免这个问题，可以尝试使用新鲜的煮死CAT酶样品，或者在样品制备和测定过程中加入适当的抗氧化剂，如抗坏血酸等，以减少样品的氧化和分解。此外，也可以尝试进行多次测定，取平均值来减小误差。

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问如何使用液氮研磨组织？

dxy_mqg1dtg8

液氮研磨是一种有效的样品制备方法，但是需要注意一些安全和操作问题。首先，将组织剪碎后放入研磨罐中，然后将研磨罐放入液氮中，等待5分钟，这个步骤是正确的。但在研磨之前，需要等待样品回到常温，这样才能进行研磨，否则样品会过于脆弱而无法研磨。其次，如果样品不易研磨，可以尝试将样品放入液氮中浸泡更长时间，或者重复浸泡和研磨的步骤，直至样品研磨均匀。关于手动研磨方法，将组织剪碎后放入研钵中，然后倒入液氮手动

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问2组相对1组，有明显统计学差异。那么，2组的标准误一定要大于1组数据才有意义吗？也不知道是不是我理解错了讲座的意义？急

feixue7758527w

不是的，不是2组一定要大于1组才有意义的。在统计学上标准误不是很起作用的，但是标准误太大还是对结果有影响的。

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问求助🆘怎么用FITC标记细菌？可以在菌悬液里加入一定浓度的FITC，然后在菌的不同生长时期取样观察荧光情况吗？

loveliufudan

是的，您可以使用FITC（荧光异硫氰酸酯）标记细菌。以下是一种常见的方法： 1. 准备FITC溶液：将FITC溶解在适当的溶剂中（例如二甲基亚砜或甲醇）以制备FITC溶液。注意，FITC对光敏感，因此在制备和使用过程中应避光。 2. 处理细菌：收集您感兴趣的细菌样品，可以是培养物或培养基中的细菌。确保细菌处于活跃生长期，并在适当的生长条件下培养。 3. FITC标记：将FITC溶液添加到细菌悬浮液

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问治癌药物在小鼠上的安全窗口达到多大才有必要做后期研究

loveliufudan

安全窗口的大小取决于多个因素，包括药物的毒性特性、剂量和给药途径、研究目的和所需临床剂量的预估。在评估治癌药物的安全窗口时，通常会进行以下步骤： 1. 急性毒性研究：通过单次给药来评估药物在小鼠体内的急性毒性，包括观察动物的行为、体重变化、器官损伤等指标。 2. 亚慢性毒性研究：在较长的时间范围内进行多次给药，评估药物对动物的亚慢性毒性效应，例如长期给药引起的器官损伤、代谢影响等。 3. 慢性毒性

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问质粒双酶切怎么做阴性对照？

sswei

酶切反应时加各单酶分别切,两管,用同一种BUFFER,跑胶,看单切的两管是否成线性.如两管均成线性可初步判断双酶切成功. 做转化时,也要进行对照. 设4个:A.即拿双酶切的质粒产物也进行连接反应,这个对照可进一步看双酶切是否成功,如果长出克隆,说明很有可能只进行了单酶切,如没长出克隆,则证明双酶切成功,当然要保证感受态,培基,连接酶都'正常'的情况下.B.酶切过的未进行连接反应的双酶切产物,进行转

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问测CAT时，是不是测每一组酶都要用对应的煮死的酶做对照啊？

土井挞克树

是的，需要每一组酶都要用对照。

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问液氮冻融法转化农杆菌，一直转不成功怎么办，菌液pcr无条带

loveliufudan

以下是一些可能的原因和解决方法： 1. 菌液PCR无条带：如果您在进行菌液PCR时没有观察到任何条带，这可能是由于以下原因： • 菌液中没有目标DNA：确保您在菌液中加入了正确的目标DNA。您可以对目标DNA进行质粒提取或PCR扩增，并在转化试验中使用适当浓度的DNA。 • PCR条件不正确：检查您的PCR反应条件，包括引物浓度、扩增温度和循环数等。确保您使用了适当的PCR引物和条件。 • 菌液处

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问流式细胞术检测cy5

吴U4GF

请问cy5.5怎么标记纳米粒啊

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问栓剂直肠给药如何对实验大鼠进行操作？

sswei

用栓剂给药时，要时刻观察是否有滑出栓剂的问题，以免影响实验结果，可捏紧肛门保持一段时间，也可固定动物头低位状态。

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问Tricine-SDS PAGE三层胶的配方及注意事项

loveliufudan

以下是Tricine-SDS PAGE三层胶的配方和注意事项： 1. 垂直电泳缓冲液（上缓冲液和下缓冲液）： • 上缓冲液（Anode Buffer）：25 mM Tris，192 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 • 下缓冲液（Cathode Buffer）：50 mM Tris，384 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 2. 聚丙烯酰

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问树突细胞鉴定流式细胞术（直接测量）需要买什么抗体

loveliufudan

在树突细胞鉴定的流式细胞术中，用于确定细胞类型的抗体可以包括以下一些： 1. CD11c：这是树突细胞的标志性表面分子，用于确认细胞为树突细胞的关键标记。 2. CD80（B7-1）和CD86（B7-2）：这些共刺激分子在树突细胞表面表达，并与T细胞激活和共刺激过程密切相关。 3. MHC-2（主要组织相容性复合体类II分子）：这些分子在树突细胞中高度表达，用于呈递抗原给CD4+ T细胞。 4.

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问AAPH和ABTS原理

loveliufudan

原理如下： 1. AAPH：AAPH是一种自由基产生剂，它通过热解产生自由基，主要是氧自由基（ROO•）。在抗氧化实验中，AAPH会引发氧自由基的产生，这些自由基可以与抗氧化物质反应并被消耗。测定抗氧化能力时，添加被测试样品到含有AAPH的溶液中，然后测量在一定时间内自由基的消耗程度。抗氧化能力较强的样品会有效地消耗AAPH引发的自由基，导致自由基的减少。 2. ABTS：ABTS是一种人工合成的

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问如何设计Fish探针

土井挞克树

fish探针设计方法：1.FISH使用的探针序列来源于基因组或BAC(细菌人工染色体)DNA，包含许多重复序列。串联重复序列(Tandemrepeat)，如存在于着丝粒的α卫星DNA(SatelliteDNA)；散在重复序列(Interspersedrepeat)，如Alu家族。2.探针中的这些重复序列，在与基因组杂交时易产生非特异信号3.人类Cot-1DNAx是在杂交中常用来封闭及去除重复序列的

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问为什么稳转Gaussia luciferase的细胞系检测不到RLU？

土井挞克树

可能是转染后存在降解，一般降解发生的比较快，降解后就检测不到rlu了

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