实验问答22,024,638 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问RAW264.7转染快两个月了，用的吉凯的慢病毒，转染效率还是特别低，有没有大神给我指导一下啊？快疯

土井挞克树

可以提高转染的浓度和时间，通常都是时间不足

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问给动物加强免疫后用流式分选出单个b细胞，分到的b细胞是？

土井挞克树

一般初期阶段都是记忆b细胞，后期是其他分群的b细胞

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问GC-MS非靶向检测，样品需要做衍生化，加一个内标够吗？

周末也要努力呀

我们做的细菌的GCMS，一个是够的，我们一般使用核糖醇作为内标

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问RNAscope目标探针没有信号目标基因pcr的ct值25，wb和IF也做了。探针做不出来。1:阳对，2:阴对，3:目标探针

huarenqiang5

样本处理过程中可能存在破坏RNA分子的情况，如过度切片或超声波破碎等。此外，如果样本冷冻或固定的时间太久，也可能导致RNA分子的降解。RNAscope实验操作问题：实验过程中可能存在RNA适配体和探针的浓度不足、杂交温度或时间不当等问题。另外，使用的探针可能不够特异性，也可能导致信号不明显。仪器问题：如果使用的显微镜或成像系统设置不当，也可能导致信号不清晰或无法观察到。

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问兄弟们，关于使用通路激活剂，怎么确定最佳浓度啊

balalaLy

看这个通路里边的经典蛋白的变化

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问组学关于组学lasso降维，以及预处理方法如何选择

晓雨知春来

组学lasso降维对于高维数据，特别是组学数据，非常有用，它可以帮助我们筛选出与目标变量最相关的特征，并去除噪声。常用的预处理方法有有数据标准化、缺失值处理、数据变换、批次效应校正、数据平滑等。可以根据不同的需要进行选择。

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问席夫碱反应的缩合率和取代度怎么算

huarenqiang5

席夫碱反应缩合率P%=Mm2xMm1x100%其中，m1为壳聚糖的质量（g)，m2为缩合衍生物的质量(g)。M1为壳聚糖结构单元的摩尔质量、161gmol-1。、M2为缩合衍生物结构单元的摩尔质量(gmol-1)。

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问干细胞心肌定向诱导分化试剂盒推荐

于小鱼鱼1998

可以尝试一些国外的厂家，赛默飞的也是不错的

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问我想请问一下对于糖蛋白组学的数据如何分析呢？

huarenqiang5

这个一般需要专业的数据分析软件进行分析，可以使用GlycanFinder 软件试试。

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问蛋白组学的组织样品需要进行怎样的处理？

土井挞克树

需要裂解，提取组织匀浆，然后进行组织蛋白组学

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问组织里的病毒属于低丰度，蛋白组学能够检测出来吗？

土井挞克树

可以的，只要达到一定的浓度值就能够检测出来

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问蛋白理化分析都有哪些指标及方法？

dxy_mqg1dtg8

1. 分子量：可以通过SDS-PAGE、MALDI-TOF MS、ESI-MS等方法来测定蛋白质的分子量。2. 含量：可以通过BCA、Bradford、Lowry等方法来测定蛋白质的含量。3. 等电点：可以通过IEF、色谱等方法来测定蛋白质的等电点。4. 构象：可以通过CD、FTIR、荧光光谱、X射线晶体学等方法来测定蛋白质的构象。5. 热力学性质：可以通过DSC、ITC等方法来测定蛋白质的热力学

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问蛋白提取时样品中蛋白的均一性不好怎么办

dxy_mqg1dtg8

可以尝试以下几种方法：1.细胞破碎条件的优化：细胞破碎是蛋白提取的关键步骤，可以选择适当的细胞破碎方法和条件。常见的方法包括超声波破碎、冻融破碎、高压破碎等。不同的样品可能需要不同的破碎方法和条件，因此可以尝试优化细胞破碎条件，如破碎时间、温度、破碎缓冲液的配比等，以提高蛋白的均一性。2.添加蛋白质稳定剂：蛋白质稳定剂可以帮助维持蛋白的稳定性和均一性。常用的蛋白质稳定剂包括蛋白酶抑制剂、还原剂和胺

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问如何提高bca测蛋白浓度的标准曲线的R值

dxy_mqg1dtg8

以下是一些提高BCA测蛋白浓度标准曲线R值的方法：1. 充分混合工作试剂：在进行BCA测定时，工作试剂的各个成分需要充分混合均匀，否则可能会影响测定结果的准确性和可重复性。因此，在使用BCA试剂盒时，需要充分摇匀工作试剂，确保各个成分均匀混合。2. 优化标准曲线的制备：标准曲线的制备对于BCA测定结果的准确性和可重复性至关重要。为了提高标准曲线的R值，可以优化标准品的浓度和数量，以及标准曲线的拟合

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问有没有用于生信分析专用的蛋白质组学测序相关的公共数据库？

土井挞克树

可以试一下这个数据库ProteinData Bank

3 回答448 围观

问目前单细胞的蛋白质组学测序分析有哪些常用的方法？

dxy_mqg1dtg8

1. 质谱技术：质谱技术是目前最为常用的单细胞蛋白质组学技术之一。最近，研究人员开发了一种称为SLIM（single-cell proteomics by mass spectrometry）的技术，可以在单个细胞中检测到超过500个蛋白质。此外，研究人员还利用微流控技术和质谱技术，开发出了一种名为SCoPE-MS（single-cell proteomics by multiplexed seq

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问转录组的误差如何通过数据统计规避

土井挞克树

可以在数据分析阶段通过加权的方式进行统计规避

3 回答492 围观

问BG11可以用来培养的藻有哪些

土井挞克树

硅藻和浮游藻都可以用bg11来培养

3 回答488 围观

问求助铁死亡抑制剂Erastin和RSL3？

于小鱼鱼1998

一般是从0.01的浓度开始，一直可以加到O.1ug/ml

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问科研技术

于小鱼鱼1998

可以上KEGG数据库进行查询，这个数据库是常用的通路上下游信号分子查询库

4 回答791 围观

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