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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
流式检测CD4T细胞分型,想用胞膜表面标记物染色请问大家都用哪些标记物呀
Dr_劉医生
看你具体是什么细胞亚群,不然太多了,常用的CD4染色的表型有CD183 , CD194 , CD294, CD196 或CD161;不同表型和亚群可以看图表,非常详细;
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问
尾静脉注射siRNA 有一个 inVivo ready siRNAs是什么意思
灵枢天问
就是说你这个注射用的siRNA.是标准化的用于动物实验体内的
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问
请问怎样保存小狗(宠物)的基因以便克隆?
bamboopiggy
可以提取小狗的genomic DNA,然后-80度长期保存。最好找专业的机构,自己保存,容易出问题。
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问
想通过双荧光霉素活性验证转录因子对启动子的影响,应该怎么转染进293T中。
cq2019
首先要弄清楚转录因子和启动子结合的区域在哪里,为了验证转录因子对启动子的活性,我们常见的是构建pGL3质粒,将启动子序列片段加载到质粒当中,然后和293T一般共培养,在此过程中需要添加转录因子的分子模拟物
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问
小分子化合物上加一个炔烃要怎么合成?
此用户已注销
可以用丙炔高温催化加水,然后烯醇重排制得。但是成本高(因为丙炔比丙酮成本高)。丙酮一般来自异丙苯氧化生产苯酚的副产物。
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问
尼氏染色
汤姆卜丽波
可能和仪器拍摄也有关,你试试调整一下参数
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问
就想问一下商品化抗体的分子量,因为要选超滤离心管的大小,但是我真不知道回答的是什么意思
灵枢天问
回答就是说你的这个抗体有两种可能的大小,一个是33一个是20你可以按照这两者买超滤离心管,分别试一下
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问
清洗工艺评价指标怎么选择呢?
pharsmile
清洗工艺由预处、清洗除垢和纯化处理三个环节组成,预处理和纯化处理可根据实际情况和清洗要求有原则的进行。主要工艺有:对于锅炉或其他有加温条件的设备,可采用金浸泡法。一般在24小时内缓慢升温升压至额定工作压力的50%,并在此状态下持续24-48小时,(用于垢型转型可略延长时间)。对于不具备加压条件的设备,也可采用常压煮洗的方法,一般缓慢地加热溶液至80-95°C 并在此状态下持续3-4天。无论用哪种方
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问
枯草芽孢杆菌电转
你好几和户
有以下方案,老师对照一下枯草芽孢杆菌电转化方案1 感受态细胞的制备1.1 从新鲜培养的平板上接种一单菌落至3 ml B2液体培养基中,试管(17×100 mm)。1.2 250 rpm,37℃培养过夜(16 h)。1.3 接种1.5 ml过夜培养的种子至150 ml(装于1L的三角瓶中)新鲜的B2培养基中,200 rpm,37℃培养,至菌数达到~1×108 cells/ml。1.4 将菌液冰水浴1
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细胞转染
bamboopiggy
你细胞转染不能长太满,大概70-80%就好。一般六孔板铺undefined10^5就可以。12孔板铺undefined10^5
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问
动物实验
汤姆卜丽波
如果你之前做过趋势稳定就可以,最好还是筛一下,稳定表达了再做动物
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问
流式细胞术
汤姆卜丽波
看你想要投稿的杂志对图有什么要求,按照要求来,对机器出的图进行标注就可以了,三组重复趋势一直的话选最有代表性的
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问
动物行为学的数据分析方法
汤姆卜丽波
这个需要你自己统计根据时间频率制表,然后统计软件进行相关性分析
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问
想问一下293t产生的病毒可以感染293t细胞嘛?是否是病毒滴度不够
汤姆卜丽波
这个应该不行吧,就算是可以感染应该也不会对细胞本身造成影响啊
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问
想探究动物体内某mRNA的半衰期,可以注射放线菌素D来抑制转录,再在不同时间点测定mRNA含量吗?
bamboopiggy
这个实验你最好用细胞来做,放线菌素D,在体内的作用浓度,尤其是你要取得那个部位,可能不好确定。
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C57BL/6小鼠皮下成瘤失败
bamboopiggy
可能是你细胞的状态不好,你放了多长时间去打的,再就是double check你算的细胞的浓度没有问题,我以前算错过一个数量级,结果在double check的时候发现了。
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问
双荧光素酶报告基因实验,研究miRNA与靶基因互作时,转染的miRNA的量与质粒的量如何确定,以及二者的比例有一个推荐值吗?
bamboopiggy
这个你只能自己做预实验来摸,每个的条件可能都不一样。
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求助 为什么SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色后再脱色条带就没有了
Eason老歌迷
可能是你上样量太低了,能染上色,但是脱完色就看不到条带。如果上样量过低,造成每条条带的蛋白量都在2ng以下,自然看不到任何条带。你需要重新对蛋白样品进行定量,如果定量无误,需要增加蛋白上样量。
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为什么我跑PCR的空白和对照在100bp附近都有有一条清晰明亮的条带,而且感觉不是引物二聚体
申东熙老伯
空白对照都有应该是污染,考虑一下是不是水污染了。
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问
油红O染色
bamboopiggy
MDA-231是乳腺癌细胞系,你是怎么处理了以后,要染油红O?这个你最好设一个可以染出来的阳性对照,否则,不好说。
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