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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
质粒测序只有单侧引物成功,另一侧引物失败,但pcr可以p出条带
Dr_劉医生
更多是引物设计的问题,3‘或5’单侧符合碱基配对能扩增。跑出条带只是说明表达了,不能说明引物的特异性
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问
细胞MDA检测时要裂解多久呢?
土井挞克树
一般细胞裂解10min就可以离心取上清了
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问
pulldown,IP实验
土井挞克树
祛除非特异性杂质,不然非特异性吸附会严重影响后续实验
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问
营养缺陷型酵母筛选失效
土井挞克树
你尝试用紫外线,或者化学试剂处理一下。
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问
信号通路
麻黄连翘赤小豆
可以查阅网药一类的文献进行综合挑选,靶点也要看测序的结果,哪个基因组表达特别明显
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问
溶剂乙二醇甲醚怎么除
此用户已注销
采用共沸蒸馏的方法就可以把水提取出来了.
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问
graphpadprism 怎么把柱状图的对照组数值都变成1呀
lanlvmaomao
菜单栏的下拉选项中 可以设置y轴对照组的值为1。
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问
大肠杆菌OD600nm值对应的细菌数量
你好几和户
一般OD600=1时对应的细菌浓度为undefined10^9cfu/ml
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问
如何从牛奶中的酪蛋白分别获得βαK酪蛋白
你好几和户
包括以下步骤:步骤1、将从牛乳中提取出来的酪蛋白粗品,加入尿素溶液中,碱液调节ph值为9-10,升温至40-45℃,搅拌溶解,然后常温下搅拌2-3h后降温至2-6℃,静置1-2h。步骤2、冰水浴条件下,用酸液调节步骤1得到的物料ph至5.0±0.2,离心收集沉淀,纯水洗沉淀至少一次,得到第一沉淀物。步骤3、取适量ph值为11±0.2的碱液,升温至40-45℃之间,加入步骤2得到的第一沉淀物,搅拌溶
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问
miRNA转染RSC96细胞
土井挞克树
可以参考刘玉璞的《。 三种转染试剂对RSC96细胞miRNA转染效率及细胞毒性影响的比较》
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问
外泌体浓度
土井挞克树
我们实验室的是这样做的,提取后的外泌体用PBS重悬,取50ul,直接加入20-30ul的RIRP-PMSF(100:1)裂解液,其余步骤同裂解细胞测蛋白一样。上机测蛋白浓度的时候,可以不加up水(或PBS)稀释十倍,而是直接加20ul的裂解上清,否则可能会浓度太低测不出
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问
gallios流式细胞仪
土井挞克树
细胞群重叠,设置问题,死细胞群没有分离出来,才会出现象限重叠
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问
求助 提PBMC的红细胞裂解法
此用户已注销
加入3~5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。加入1倍血液体积的红细胞裂解液重悬沉淀,500g离心3分钟,弃上清
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问
求助:大鼠MCAO模型,颈内颈外傻傻分不清楚
土井挞克树
很显然粗的是颈外,另外一条是颈内
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问
maldi-tof MS出峰处的m/z就是分子量吗
土井挞克树
不是分子量,质荷比得出之后带入公式才能计算分子量
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问
FITC单染管调补偿
土井挞克树
单染管作为对照,补偿调节样本必须可染出一群强阳性(或一群阳性和一群阴性),以比较它们之间的平均荧光强度,这样补偿调节方可准确。
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问
可以用小鼠来源的IL-1b刺激人软骨细胞从而构建OA模型吗
土井挞克树
非小鼠来源的可以刺激小鼠,但是小鼠的刺激人。这个好像没有先例,最起码首先确定他们蛋白氨基酸序列是否一样
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问
细胞转染
申东熙老伯
很正常,有的加嘌呤霉素细胞就会死很多了,可能是抗性基因还没表达,所以一消化就死了很多。
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问
C57小鼠高血脂模型如何建立?
Dr_劉医生
饲料的脂肪占比够了,我的意见是饲料喂养是12w诱导模型太长了,一般6w即可;建议尽快采集血样看下血脂情况,否则建立的不是高脂模型,可能是代谢并发症(糖尿病、脂质异常等)模型,那就不能用了。
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问
我跑qPCR时,熔解曲线的样本在水(阴性对照)的峰上没有,而在阳性对照的峰上有样本的峰,
lanlvmaomao
你的融解曲线怎么样 是否单峰特异
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