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问
上周蛋白浓度要不要调一致?
秋秋欣欣
最好是调成一致,结果才能达到半定量
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问
一种上皮细胞中剪切的caspase3和9丰度不够,如何避免蛋白降解?
Eason老歌迷
可以用0.22um的膜过滤啊,别的膜过滤还是会有细菌存在,0.22的可以达到无菌要求,这样样本因为细菌导致的蛋白降解就不会产生了。
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问
分子量小于1万道尔顿的,使用什么蛋白marker?电泳条件是什么?
bamboopiggy
你去一些卖marker的官网上找,保证有小于10KD的marker可以用,建议你用15%的胶跑就可以
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问
我做的是小鼠海马组织,4度生理盐水灌注,4%多聚甲醛灌注,沉糖.OCT包埋,-20度切片,但是细胞大部分有空洞
balalaLy
一般说速冻是把组织放进液氮中速冻,我试过,效果并不理想。有同学建议用防冻液可以很好地防止冰晶产生,不会有空洞。你可以试试。
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问
所有WB实验都用总蛋白就可以完成吗?
balalaLy
大部分蛋白是只需要看总蛋白,有些蛋白失活、激活状态分别在不同的地方表达,就得看总蛋白和活化部分的比例,比如NF-kB需要看入核部分和胞浆部分。
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问
顺铂带进SPF如何消毒
balalaLy
顺铂溶液本身是无菌处理过的吧,外包装酒精擦拭之后放入消毒后的铁饭盒或者用锡纸包裹,放入传递窗紫外消毒。
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问
我想找一些预测实验依据的网站或者软件?求助
379 围观
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问
做RNA转染实验时铺板的时候需要在无RNA酶的环境下操作吗
whilt-shirt
需要的,RNA酶会裂解RNA导致转染效率低或者失败
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问
蛋白分子量标准品200kD的条带经常分层,如何解决呢?
whilt-shirt
选用浓度更低的胶,比如8%或者6%,marker选10-250kd
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464 围观
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问
DNA检测时,蛋白消化效果怎么评估?
天一湖医者
对消化后的蛋白残留量进行评价WB比较好。
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问
树突状细胞的流式细胞分析
bamboopiggy
你如果没有做过,最好找平台的老师帮你弄,做好阴性对照。阴性对照和阳性结果之间会有很明显的差异的。
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问
NC 膜 PVDF 膜 尼龙膜的差异。
天一湖医者
NC膜只可以和单链rna.dna在高盐条件下结合,与dna分子非共价键结合,易丢失dna.而且NC膜很脆,易断,不能反复使用,优点是对探针和蛋白质吸附作用较弱,杂交信号本底低。尼龙膜可以与单链及双键多核苷酸链结合,与DNA共价键结合,可以反复利用10到20次,膜强度高,不易破坏,优点是可以重复使用,碱可以促进DNA与尼龙膜的结合。
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748 围观
3 回答
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问
紧急求救 流式测凋亡
balalaLy
细胞太密会影响药物的效果,建议还是重新铺板吧
1 回答
245 围观
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问
MCAO小鼠模型求助
sunny陈520
这个的确不好做,而且死亡率也高,不过多练习也可以的,以前做的时候用的是那种鱼线,很细,插进去的那端平口剪成斜口会好进去点哦
1 回答
739 围观
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问
流式细胞摄取实验数据大神指点怎么处理啊?跪求各位
Eason老歌迷
有没有使用补偿算法和归一算法对原始数据进行处理啊
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274 围观
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问
miRNA minics和质粒进行共转染?
Eason老歌迷
理论上共转染的时候minics和质粒可以分别用不同的转染试剂进行转染。但是我没有试过这种方法。
2 回答
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问
温敏质粒pset4s敲除链球菌基因时,升高温度,质粒也无法丢失,始终处于单交换的状态。
399 围观
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问
有没有是血红素诱导的下游基因产生色素的基因开关呢?
402 围观
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问
如何查找自己需要的基因开关
490 围观
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问
为什么蛋白纯化后分子量变小了?
Eason老歌迷
这个属于正常,纯化后有洗脱,浓度更纯,可能分子量就变小了。
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