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科研学霸天团,48小时有问必答
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LAMP引物设计过程中出现300多条,如何进行筛选?
Eason老歌迷
300多条引物?你就从gc含量,从产物长度,从有无二聚体产生,有无错配等筛选,肯定合格的就少了
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问
Elisa实验包被抗原,封闭之后可以保存板子下次再用吗?
府宅
37℃的条件下放置15天都没有很大的影响,关键要看包被的原料稳定性
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问
脑缺血再灌注(MCAO)大鼠实验时间点设计问题
Eason老歌迷
这个就是前期做大量预实验,或者是你查看文献可以获得。我们都是选几个时间点,然后观察各项指标,然后选差别最大的那个时间点去进行后续实验。
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问
各位大佬,请问这个是胰岛细胞吗以及为什么DTZ染色那么浅?
Eason老歌迷
应该是是胰岛细胞。可能是你的细胞数量不够啊,你的dtz是用dmso配的啊,那你可以用dtz溶于无水乙醇试试染色效果怎么样。
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问
膜片钳,这个试验好做吗(第一次接触呀)
府宅
膜片钳试验不好做,无论是实验前的准备工作,还是封接、记录,一定要细致、有耐心,。
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问
【求助】外泌体蛋白跑WB的问题
whilt-shirt
膜蛋白是不能煮的,只能加loding后直接上样
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问
流式细胞学细胞状态问题
Eason老歌迷
可能是你的细胞传代时候时机不对,细胞老化了。也可能是你细胞发生了污染,比如说支原体污染黑胶虫污染。
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问
轴突测量
balalaLy
可以的,奥林巴斯的显微镜有自带的测量标尺,
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问
细胞转运抑制剂加了以后,摄取量增加了
张奕聪
请问问题解决啦嘛,我也遇到加抑制剂后摄取增加的现象了
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问
小鼠mcao后易死亡
Eason老歌迷
有几个原因,一个是麻醉不能过深,不然在分离颈总动脉,牵拉迷走神经和气管时,动物易死亡。二个是如果插线有困难,勉强进入后,动物损伤重,易死亡。
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问
请问烟草注射农杆菌瞬时表达的T-DNA整合进基因组么?
Eason老歌迷
有,我之前看过一篇文章,“农杆菌介导的基因瞬时表达技术及其应用”,讲的很详细。
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问
师姐构建的Bacmid(重组杆粒)只剩下10微升左右,老师跟我说可以重新转
Eason老歌迷
是不是你转化的过程,哪一步没做好啊?之前师兄转化时间没掌握好,也是啥也不长。
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问
以某种项目的定量结果为因变量,分析该变量用于某种疾病诊断的影响因素,如肝肾功能、是否服药、标本是否溶血等,应使用哪种分析方法?谢
Eason老歌迷
可以用单因素风险分析,比如说做一个森林图,看它的置信区间。
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问
WB实验,一抗是单抗,为什么会出现非特异性条带
whilt-shirt
有可能是抗体浓度过高导致的,建议稀释抗体浓度试试
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问
求助!神经逆向追踪技术?
Eason老歌迷
这个很多人在做,已经很成熟了。我们实验室总用的是电离子渗透导入法。电离子渗透导入法是利用示踪剂分子所带电荷量的大小,通过给予外加电流使示踪剂分子被电场作用力导入至注射部位的一种示踪剂导入方法。通常情况下,人们会将电流直接外加到吸有1-10%浓度示踪剂溶液的微量移液器上,根据电极头直径的不同,电离子渗透导入法除了可以应用于示踪剂的细胞内注射外,还可以应用于示踪剂的细胞外注射。以具体的操作为例,在进行
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问
PI染色后流式检测,G2期总是很低或者干脆检测不出来,可能是什么原因
Eason老歌迷
要是g2很低或者是检测不出。细胞经药物处理后无G2存在这很正常,可以考虑为细胞周期阻滞,调节check piont 即可,想进一步分析机制做做Wb,检测那几个周期调控因子。
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问
做基因多态性时,怎样区分突变型和野生型
Eason老歌迷
野生型是自然种群中最常见的一种,其突变发生于野生型,突变型在自然界中所占比例很小,在自然界中占很少。至于怎么区分,你可以上ncbi上查,就可以查到哪个是突变型哪个是野生型。
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问
尤文肉瘤A673在小鼠上能建模成功吗
Eason老歌迷
你是要在小鼠上建模吗?这个可能性很低啊,就是你打进去,小鼠也有免疫系统会多少能杀伤外来异物。为什么选裸鼠不就是因为它没有免疫系统吗
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问
求助,神经示踪技术,在外周追踪到脊髓,但是到达背根神经节之后就不在逆向向上到达脊髓,有什么试剂或者染料啥的可以做到吗,刚接触这些
Eason老歌迷
神经示踪技术已经很成熟了啊,目前研究中应用较多的逆行示踪剂有:霍乱毒素B亚单位、荧光金、辣根过氧化物酶、固蓝、异硫氰酸盐罗丹明、羰花青染料、荧光乳胶微球、生物胞素和神经生物胞素等都不错,你可以试试。
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问
如何在NCBI中上传基因簇序列获得genebank号呢?
Eason老歌迷
你可以打开sequin软件,点击开始一个新的提交(当然您也可以编辑已保存文件);填写必要的信息:title、author、联系方式及机构信息等,后面默认选Next;添加序列:准备FASTA文件,可以选择上传单个序列或者批量上传多条序列:添加必要的序列信息。然后上传即可。
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