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问
有人用小鼠卵巢癌细胞ID8种过C57的皮下瘤吗?
Dr_劉医生
建议用裸鼠,或者周龄小一些(4w左右)的雌鼠,或者增加ID8的浓度
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问
浓度100mg/L重金属铜的LB固体培养怎么配?培养基是什么颜色的?绿色,蓝色?
土井挞克树
通常是蓝色1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。3.倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。在分子生物学试验中LB培养基常常用
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问
腹腔注射皮质酮不溶解怎么办?
Dr_劉医生
皮质醇是类固醇类,建议用脂溶性的溶剂,保证不分解的情况下,可在PBS液里加一些稳定剂,
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问
伯乐这个侧边夹如何拆下来?
bamboopiggy
你还是找伯乐的售后帮你弄吧,否则弄碎了,你这个架子都不能用了。
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问
【求助】单个基因的多个snp位点间可以做多因子降维分析(MDR)分析吗
Dr_劉医生
可以做,只要是有多个变量(多个SNP也属于)就能做MDR,但得注意单基因上SNP间关联作用,最好加一个调整变量
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问
瞬时转染需要计算转染效率吗
土井挞克树
默认一致就可以,你不需要这一项可以不算。
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问
基因克隆技术开展成熟吗
灵枢天问
现在基本上很成熟了,有模板和特异性引物就可以克隆到你想要的基因片段
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问
裸鼠皮下接种SW620细胞,瘤子为什么会溃烂
灵枢天问
都会出现这种情况可能是本身注射时出现了感染,这么大的破溃基本上活不成了
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问
探针法荧光PCR可以同时扩增3kb和2kb的基因吗
灵枢天问
可以是可以的,但是后续产物需要跑胶纯化
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问
his标签的蛋白过柱子,洗脱不下来,洗脱液咪唑浓度已经达到0.5M。
灵枢天问
如果不好洗的话,那就得再加一点咪唑,我们可以提到0.8
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问
求助!!!嘌呤霉素筛选THP-1最适浓度预实验,为什么细胞达不到90%的死亡率?
灵枢天问
这个程度的死亡率有可能再加一点就上去了,再细分一下浓度
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问
相差1KB的基因可以PCR同时扩增吗
bamboopiggy
相差1kb的基因可以用pcr同时扩增,只要你的TM值相差不大,另外,跑realtime pcr,不在于基因的长度,而在于你pcr产物的长度
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问
溴酚蓝在电泳时有可能分离为3个条带吗?
灵枢天问
可能是配的太久了,成分分层了,没事不影响结果
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问
明胶酶谱法
Dr_劉医生
NP40可以用,属于温和的细胞组织裂解液;MMP-9检测用一般的化学细胞裂解液就可以,没什么特别的,常用的trizol裂解液;
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问
求助 sd新生大鼠腹腔注射lps
Dr_劉医生
不需要补充注射,那是说明小鼠炎症模型没有造模成功;可能是你的浓度太低了,一般脂多糖LPS诱导炎症模型都是尾静脉注射10mg/kg的LPS溶液
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问
实验求助
Dr_劉医生
最常用的就是电转化,给你附上protocol供参考,但我建议你按照文献和试剂盒的细节具体操作。实验试剂:GM:LB+0.5M 山梨醇。ETM:0.5M山梨醇,0.5M甘露醇,10%甘油。RM:LB+0.5M山梨醇+0.38甘露醇电转仪:Bio-Rad的gene-pulser方法:1)新鲜平板挑单菌落(小一点为好)接种于5mlLB培养基中,过夜培养.。 2)测量摇管内OD,控制好接种量,使接种完毕后
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问
如果做抗凋亡的动物体内模型的话,需要多少天之后取材呢,一周吗?
Dr_劉医生
只做组织水平,可以一周内取材;如果还要做细胞水平的抗凋亡作用,建议48h内,不超过72h,
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问
质粒测序只有单侧引物成功,另一侧引物失败,但pcr可以p出条带
Dr_劉医生
更多是引物设计的问题,3‘或5’单侧符合碱基配对能扩增。跑出条带只是说明表达了,不能说明引物的特异性
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问
细胞MDA检测时要裂解多久呢?
土井挞克树
一般细胞裂解10min就可以离心取上清了
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问
pulldown,IP实验
土井挞克树
祛除非特异性杂质,不然非特异性吸附会严重影响后续实验
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