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科研学霸天团,48小时有问必答
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更换转染试剂
c_Yeats
不同的转染试剂比例是不一样的,建议参考对应的说明书有推荐的比例重新摸索一下。
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问
测酶活加样时产生了气泡,有什么方法可以消除气泡啊?
huarenqiang5
1.加样时尽量靠近孔底(不要接触孔底),用力均匀,不要过快过猛。 2.封闭时一定要加满孔。 3.洗涤时一定要加满孔。手工洗板时一定要吸干水分并用力拍干。
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问
鼠尾胶原蛋白在中性pH、室温下容易成胶吗?
土井挞克树
正常,你用之前静置就可以,用前不要晃。
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问
这里的分光光度计是紫外,还是可见光?
土井挞克树
可见光的效果肯定不好,你给的是紫外,一般都用紫外
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问
数据库提问
土井挞克树
还是你设置的问题,全都是同样的话结果一定一样。
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问
这数据这么理解?
土井挞克树
满意度显示的包括术前术中术后三部分,那么术前eras组可能由于准备多满意度就低,具体到细节,你可以做分别做,就互不影响了
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问
双抗法做胶体金试纸条,只加样稀显色
Dr_劉医生
胶体金试纸的问题,胶体金试纸的准确性高度依赖于抗体的特异性(抗体特异性不好容易有交叉反应)。
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问
炎症刺激
土井挞克树
药物一般是在加LPS之后再加。
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问
厌氧菌培养
土井挞克树
你说的三种管都要严格操作,每次照40min紫外,厌氧菌不好培养
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问
细胞质谱求助
huarenqiang5
完整检测细胞代谢产物,应该分两块,一块是胞内代谢,一块是胞外代谢,两种样本都收集,一起去检测。胞内代谢就是收集培养的细胞,做代谢的话每例样本一般需要10的七次方个比较保险;培养液的话有200ul左右就可以。
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问
pomc是阿黑皮素原,那pomca是什么呢?
Dr_劉医生
POMC是前阿黑皮素原神经元,PMOC-α是POMC神经元通过释放阿黑皮素原的剪切产物促黑激素
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问
请问,瞬时转化,算不算遗传证据?还是需要能稳定转化的才算?
huarenqiang5
瞬时是一短暂的证据,不是遗传。遗传是需要稳定的数据来确定的
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问
请问流式检测凋亡,一般处理组与对照组的差异为多少,表明处理组有效率。
土井挞克树
要想知道处理组有没有意义,要学会看流式图。实验结果图通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。
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问
标记红细胞内的酶,应该用什么荧光(激发,发射波长),以避开红细胞的自发荧光?
土井挞克树
红细胞内血红蛋白会产生自发荧光红细胞的自发荧光减少方法交联固定诱发。使用非醛类固定剂,比如冰乙醇,可有效降低交联固定而诱导的自发荧光。红细胞。动物组织取材固定前,先用PBS进行灌注。先进行预实验。检测自发荧光的波长范围,再选择与自发荧光荧光信号波长相差较大荧光信号。组织自发荧光淬灭剂。自发荧光淬灭试剂中的离子可通过碰撞方式,捕获自发荧光光源分子发出的电子,阻止该电子从激发态回归基态和能量释放,从而
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问
我要用流式测外泌体上的蛋白marker,一定要用磁珠吗,有没有提供具体的步骤
土井挞克树
磁珠要用的步骤可以参考【1】具体而明确的检测 【2】定量分析,荧光与外植体量之间有很好的相关性。 【3】直接检测细胞培养上清液和生物液中的外泌体。无需分离或沉淀 【4】需要的样品量非常少 【5】灵敏度更高,动态范围更广。即使是少量的样品,也能保证检测结果。 【6】可重复性 【7】允许外泌体捕获细胞群的同时进行免疫表型分析
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问
NADPH从胞质进入线粒体基质的穿梭机制
土井挞克树
NADPH的穿梭机制是等价还原物的穿梭机制,给你发机制图
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问
D-半乳糖造细胞衰老模型,该用什么溶,是pbs还是DMSO?
土井挞克树
pbs就可以。PBS调成弱酸或者弱碱稍微温热一下就能全溶基本不影响溶解度的。
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问
THP-1细胞构造脓毒症模型能不能直接用lps,不加pma?
土井挞克树
PMA一般用来诱导单核THP-1分化为巨噬细胞样细胞,LPS目的是诱导M1 polarization.,如果你不需要巨噬样细胞可以不加
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问
我做了一个随机对照前瞻性研究,探讨一个药物对疾病的有效性并分析各因素的相关性
Dr_劉医生
1.用试验组和对照组进行比较,不然你得药物干预等于没用,也就不属于随机对照试验;2. 治疗前、治疗3个月和治疗6个月,3个时间点不需要做三次,可以直接做时间变化曲线(KM曲线),用COX回归分析;3. 把因素4、5当作协变量,在回归分析模型中给adjusted因素4和5,如果还有统计学意义,就能说明不和因素4、5有关,反之则是由于因素4和5导致的
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问
Methods and Protocols系列丛书
Dr_劉医生
算是论著,看文献引用方式就知道,没有journal
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