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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
请问细胞铺96孔板先给药预保护俩小时再加造模剂,最后测细胞活力。这期间给药和造模剂的浓度怎么控制?
huarenqiang5
浓度每一孔250μl。通常每一孔不少于100μl。
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问
请问一下柠檬酸钠比色法具体操作过程?
loveliufudan
柠檬酸钠比色法是一种常用于测定葡萄糖含量的方法,下面是具体操作步骤:首先将样品制备好,一般是将待测样品经过必要的处理,比如去除杂质、稀释等,使其适合测定。准备一定浓度的柠檬酸钠试剂,通常是1%柠檬酸钠溶液。将样品加入比色管中,再加入适量的柠檬酸钠试剂,混匀。将比色管放入沸水中加热10分钟,使其反应完全,然后取出冷却至室温。加入10倍体积的稀释液,混匀后使用分光光度计在波长为520nm处测定吸光度值
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问
四因素三水平正交实验。
sswei
不合理,需要对整个实验重新进行。
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问
毕业论文做的科里一个老师的课题,我做的方案年龄有拓宽,还需要重新过伦理审核吗?
sswei
需要进行伦理资料补充审核。两个老师都写上去。
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问
transwell染色后用PBS洗三遍晾干后有结晶是啥原因?
loveliufudan
结晶的出现可能是由于使用的PBS中含有过多的离子,这些离子在干燥过程中结晶,导致结晶形成。为了避免结晶的出现,可以尝试使用去离子水代替PBS进行洗涤,并在洗涤后彻底干燥Transwell膜。另外,也可以调整PBS的pH值,以确保其最大限度地溶解其中的盐类。
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问
CD4+T细胞rna提取浓度和纯度总是太低如何解决?
土井挞克树
更换提取方法,或者增加上样量。
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问
双荧光素酶实验裂解细胞前有必要用PBS清洗细胞吗?
土井挞克树
有必要,可以大部分清理掉污染和杂质的干扰
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问
T载体连接转化后挑选阳性菌落跑菌液PCR,然后送测序,测序结果与参考序列比,长度少了100bp左右,这是为啥呢?
土井挞克树
考虑体系内存在降解,可能是在pcr过程中断裂
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问
如何通过免疫组化实验来确定某个蛋白质是一个潜在的免疫识别分子?
土井挞克树
可以使用已知抗体去验证未知的免疫识别分子,如果产生了特异性结合,那么可以确定这个蛋白是潜在的免疫识别分子
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问
请问完全培养基培养条件下,dc2.4细胞是可以不断增殖的吗?我感觉我的dc细胞长得和肿瘤一样快,不知道是不是被肿瘤细胞污染了
loveliufudan
DC2.4是一种小鼠树突状细胞(DC)系列,该细胞系来源于小鼠的转基因肿瘤,可以通过不断培养来保持细胞增殖。然而,这种细胞系的增殖速度比其他小鼠DC系列要快,可能会让人误认为被肿瘤细胞污染了。因此,需要通过一些特定的标志物和功能特征来鉴定DC2.4细胞是否具有树突状细胞的特征,例如:CD11c、CD80、CD86等分子的表达、分泌IL-12和IL-10等免疫调节因子。此外,在进行细胞培养时,需要注
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问
内源性过氧化物酶的灭活时间和浓度是什么?
土井挞克树
一般灭活需要10min,重复三次。
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问
求问如何明确目的蛋白的哪个功能结构域起作用?
土井挞克树
可以做肽链分解或者肽链合成来验证
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问
细胞铺96孔板,隔天换基础培养基,换完后个别孔里的细胞中间状态就不一样了,请问是什么原因呀?中间这种细胞后面加MTT染色就
土井挞克树
考虑是加入的浓度不合适,对细胞产生了分选,可以稀释后加入
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问
请问有没有大佬有新物体识别的好方法,我的一批正常小鼠对新物体并不是特别感兴趣,甚至更喜欢旧物体?
土井挞克树
尽量保证环境不变只变物体,会提高接受能力
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问
请教大鼠鞘内腺相关病毒注射怎么操作呢?是需要鞘内置管 还是可以像小鼠一样定位注射?
土井挞克树
如果需要联系注射建议置管。如果是单次注射可以不置管
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问
6E,8E质粒载体是干嘛用的,怎么使用?实验步骤具体操作?
土井挞克树
质粒载体是辅助dna片段序列插入的载体。
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问
LLC肺癌组织如何分离为细胞做流式?
土井挞克树
不考虑后续的话建议胰酶,胶原酶、透明质酸酶和DNA酶都加用,可以裂解的好一些
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问
有没有提原生质体的大佬呀,可不可以帮我看下我这提出来的是不是原生质体呀(材料是木本植物叶片,叶片很小,属于针叶,40倍镜下观察的
sswei
原生质体就是植物细胞除去细胞壁后剩下的部分,该片显示少,建议再多做几张片。
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问
c56小鼠做uuo死亡率高么?
sswei
即使经验丰富的老手操作,使用小鼠进行UUO法制备模型,死亡率也会很高。同时,小鼠组织太少,如果检测指标较多而动物数又不够,可能会出现组织量不足的情况。建议选大鼠。
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问
小鼠脊柱骨折模型制备需要注意些什么,才能提高模型成功率
土井挞克树
需要注意制备的时间,一般是新生鼠一个月后进行制备比较好
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