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实验问答28,269,440 科研人在看

其他

问分子克隆测序都是载体的的序列？

土井挞克树

说明载体没连接或者载体脱离了，需要重新连接

4 回答1014 围观

问实验中用到的buffer的配置详细是什么试剂进行配置，以及蛋白含量和对应磁珠用量的具体比例是什么？

土井挞克树

buffer的配置有很多种方法，可以参考下表

3 回答448 围观

问一个基因有三个转录变体，克隆基因时会对测序结果造成影响吗，影响克隆基因吗

huarenqiang5

一个基因有三个转录变体时可以用以下两种方法进行基因测序： 1.设计CDS引物，通过提取组织RNA，并设计相应引物，运用PCR的方法获得目的基因CDS序列，连接到克隆载体后，挑取单克隆进行测序。这种方法相对成本较低，但是PCR过程可能引入突变。适合基因CDS序列较短的情况。 2.全基因合成：根据目的基因的CDS序列，直接交给公司设计合成目的基因。此方法优点准确

3 回答539 围观

问小鼠腹部皮肤缝合后缝线被咬掉有什么办法，需要再次补缝合好么？再次缝合需要再次麻醉么？

Ckkdien

防止小鼠撕咬缝线目前最好用的是实验鼠专用伊丽莎白圈，参考文献中mice were housed individually and fitted with Elizabethan Collars（E-collars）（Kent Scientific Corporation）to prevent bitinf of sutures.国内也有生产的，网上有佩戴方法的视频教学。最好是再次麻醉后补缝合。

6 回答1977 围观

问根系泌氧（rol）具体测定方法

sswei

柠檬酸钛液体的制备方法，包括以下步骤：S1.烧杯中加入蒸馏水，将柠檬酸倒入烧杯中，并同时搅拌，至柠檬酸完全溶解，再向该溶液中滴加四氯化钛盐酸溶液，同时搅拌，保持烧杯内的温度在25℃，连续搅拌20分钟；S2.向S1中的烧杯内加入氯化铁，搅拌2分钟后加入氯化锌，再次搅拌2分钟后加入二氧化锰，再搅拌2分钟后加入硼酸，搅拌2分钟；S3.向配置好的溶液内缓慢加入乙醇，搅拌，不定时的使用pH剂检测溶液的

4 回答2376 围观

问薄膜水化法制备聚合物囊泡，在水化过程有絮状物析出，有什么解决办法吗？

sswei

生成成沉淀原因大约是因为甲醛与聚乙烯醇发生分子间的缩醛反应，使原本线性的聚乙烯醇变成T型交联，分子量变大而沉淀出来，而缩醛，办缩醛的反应是可逆的，并不稳定。只有相邻的两个羟基与甲醛形成的五元环状缩醛才稳定，而这样的产物是线性的，加上众多的羟基，醚键都是亲水基，溶水性好。因此，析出的沉淀会逐渐解去不稳定的T型交联，变成线性的，相邻五元环的可溶性聚合物，又会溶解。

4 回答1504 围观

问小鼠蔗糖饮水实验瓶子漏水怎么办呀

sswei

糖水偏好测试过程中偶尔会存在饮水瓶漏水的现象，这种情况有可能是实验员操作失误，有可能是饮水瓶位置放置不正确，也有可能是动物舔水过程中无意泄漏的，这些现象很多时候可能会导致在规定时间内获取的动物舔水摄入量差异不明显（动物单次饮水量本就很有限），这个时候用户可以选择糖水偏好测试仪的计算出的动物舔水次数、饮水时间、舔水频率等数据来参考统计，或许是另一条评估的好思路。最重要的是在正常实验前一定要检查好水瓶

4 回答994 围观

问请问如果我的细胞需要经过刺激之后给药，那么在小室接种细胞时，这个细胞是给药和刺激完成后再接种到小室中

loveliufudan

这取决于你的实验设计和研究目的。如果你的目的是研究给药和刺激后细胞的生物学响应，那么你需要先刺激和给药，然后将细胞接种到小室中进行观察。如果你的目的是研究细胞在给定条件下的反应，那么你可以先将细胞接种到小室中，然后进行刺激和给药。在任何情况下，你需要注意细胞的状态和实验条件，以保证实验结果的可靠性。

4 回答282 围观

问苏木素复染过程中，如果染色不理想可以补救吗？怎么补救？

huarenqiang5

能够进行补救，染色深则分化时间稍长些即可；染色浅则再置于苏木素中染色即可。

4 回答1175 围观

问实验过程中，切片上有一些空余的地方会非特异性吸附抗体，造成后续结果的假阳性，怎么才能避免这种情况？

huarenqiang5

进行封闭后然后再进行一抗孵育这样可以有效避免假阳性的发生。

5 回答311 围观

问实验过程中，石蜡切片染色过程中总是出现脱片现象，怎么有效避免？

huarenqiang5

一般来说，如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话，如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。可以试试一下的方法：a.我们一般用APES：丙酮=1:50的处理液来处理片子，处理5min左右，然后水洗，烘干既可用于贴片。如果把水滴再处理好的片子上，水比较聚的话说明片子处理的好。b.贴片子的时候，展片的时间要把握好，不要太长，否则不利于贴牢。c.烤片子也

6 回答3059 围观

问求问大鼠CD4+T细胞体外培养必须用人白介素2吗，大鼠白介素2行不行，一般具体加多少呢？

sswei

4 回答638 围观

问药品的防霉实验怎么做

土井挞克树

孢子悬液可以直接接种在PDA平板上实验

3 回答488 围观

问蛋白对接Zdock中蛋白过大问题

huarenqiang5

蛋白大分子按以下步骤进行预处理：1 在执行vina分子对接过程中，主要的预处理软件事Autodock tools这个软件，前面我们已经介绍过其安装过程，首先打开这个软件；2 应用该软件打开已经准备好的蛋白分子，注意要放在我们指定的文件夹中；3 对该蛋白分子进行加氢反应；4 选择所有的氢原子，点击OK；5 计算蛋白得电荷；6 然后将蛋白保存为PDB格式就好，这个蛋白分子是已经加氢完毕；7 可以直接替

3 回答3524 围观

问microrna载体构建

loveliufudan

miRNA的前体是一段长链RNA，通常会被Drosha核酸酶和Dicer核酸酶剪切成成熟的miRNA分子。在构建miRNA过表达载体时，需要将miRNA的前体序列插入到适当的载体中，以实现高水平的miRNA表达。在设计前体引物时，需要遵循以下原则：引物长度：miRNA的前体长度一般在100到300nt之间，因此前体引物的长度应该在200到500bp之间，以确保充分覆盖前体序列。引物序列：在设计前体

2 回答1263 围观

问什么是析出沉淀制备混悬液？

土井挞克树

就是原本用水溶的更换醇溶，更换溶剂后溶解度会改变

3 回答532 围观

问cat酶活性计算问题

huarenqiang5

是的，是每个样品的最后一分钟吸光度，建议多次几次然后取平均值这样结果更精准。

3 回答953 围观

问请问如何对双组分系统中的反应调节蛋白上的Asp进行体外磷酸化？

sswei

根据磷酸氨基酸残基的不同，磷酸化蛋白可分为4类：O-磷酸蛋白、N-磷酸蛋白、酰基磷酸蛋白和S-磷酸蛋白。蛋白质磷酸化的研究方法最广泛使用的技术是Western-blot，质谱和同位素标记结合免疫印迹-化学发光分析，Phos-tagTM SDS-PAGE。

3 回答1409 围观

问为什么毕赤酵母诱导蛋白的酶液有酶活没有蛋白条带？

loveliufudan

毕赤酵母诱导蛋白的酶液有酶活但没有蛋白条带可能有以下几个原因：1.蛋白质表达量很低：在SDS-PAGE分离蛋白质的过程中，如果表达量很低，可能无法检测到蛋白条带。2.蛋白质在毕赤酵母中表达不稳定：毕赤酵母中的表达系统和真核生物不同，蛋白质的表达往往是暂时的、非常短暂的。如果蛋白质表达不稳定，可能在采集样品的过程中已经被降解或丢失。3.蛋白质被部分降解或结构发生改变：蛋白质在毕赤酵母中表达时，可能会

3 回答739 围观

问细胞程序性死亡与调节性死亡的区别

sswei

细胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）是一种基因指导的细胞自我消亡方式。P程序性细胞死亡的亚型包括细胞凋亡、自噬和坏死性凋亡。调节性细胞死亡涉及效应分子参与的信号级联反应，具有独特的生化特征、形态特征和免疫学后果；其中发生在生理条件下的调节性细胞死亡也被称为程序性细胞死亡(PCD)

3 回答3692 围观

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