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        分子克隆测序都是载体的的序列?

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        dxy_qpdj0yb6

        为什么基因克隆测序都是载体的序列?是因为载体没有连接上吗?

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        4 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        说明载体没连接或者载体脱离了,需要重新连接

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        可能是以下原因:(1)目的基因未连上去,测序时测的是空载体;(2)挑菌的时候没挑到单克隆,菌落由空载体和连接成功的载体共同组成,测序时测到了空载体。

        user-title

        sswei

        有帮助

        克隆测序就是将要测序的片段插入到克隆载体中,获取含有待测片段的质粒,然后进行测序。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在基因克隆实验中,通常会将目标基因插入载体中,然后转化到宿主细胞中进行扩增。因此,进行基因克隆测序时,我们通常会测序的是整个载体序列,而不是目标基因的序列。

        这主要是因为在克隆实验中,我们使用的载体常常包含有多个元件,例如启动子、转录终止子、选择标记等等。因此,测序整个载体序列可以帮助我们确定插入目标基因的位置和方向,以及确认是否成功克隆了目标基因。另外,在一些克隆实验中,我们需要使用特定的限制酶进行酶切和连接,这可能会导致某些序列被剪切或删除。因此,测序整个载体序列可以确保插入目标基因的序列完整无缺。

        此外,如果我们只测序目标基因的序列,通常需要在测序前对插入载体进行纯化和测序前处理,这可能会增加实验的复杂性和成本。因此,在实验设计时,我们通常选择测序整个载体序列,以简化实验流程和减少测序成本。

        需要注意的是,如果我们仅仅测序载体而未检查目标基因是否真正插入载体中,那么我们无法确定插入的基因是否是我们所想要的,因此在实验过程中需要注意充分验证克隆结果的准确性。

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