设置参数: 旋转参数调节旋钮来调节箭头所在的位置,来选择需要修改参数的地方。按一下旋钮,选择该参数项,再旋转旋钮来调节参数大小,调好后,再按一下旋钮,返回到参数设置界面。在选择其他需要修该的参数。基本上所有参数都是这样设置的。 可以设定的参数有:电压,脉冲宽度,脉冲次数。 保存程序: 在设置好参数后,选择“SAVE”,按住旋钮不放,直到出现新的界面:“saved ...
1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微 ...
虽然PCR仪器不是一种计量仪器,但其主要作用原理与基本计量要素密切相关,要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR仪器也需要定期检测和维护,这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。 在仪器的维护保养中,需要注意以下问题: 1)PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少一次。 2)PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1&mdas ...
1、新建文件菜单File → New,Assay选择Absolute Quantification(实时定量模式),打开一个空白的96孔板文件。 2、探针设置双击任意一个孔,打开Well Inspector窗口。该窗口也可以从菜单View → Well Inspector打开。 3、首次使用软件,或者探针(Detector)没有设置好,请点击Add Detector按钮,打开D ...
定量PCR仪主要由两部分组成,一个是PCR系统,一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的,对于定量PCR系统来说,重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等,更重要的还在于样品孔之间的均一性,以避免微小的差别被指数级放大。至于荧光检测系统,多色多通道检测是当今的主流趋势&m ...
开启PCR仪电源至ON 位置;屏幕显示版本信息后,出现step to edit file# 。 SOAK file# 的编辑: file# 是在某一温度下持续无限长时间,即只可修改温度。按 file →→Enter键;显示SOAK temperature (0-00) ℃;可根据实验需要修改温度,如要0℃,按,0,再按Enter键,显示End of file,RUN-STORE ...
一.打开电源,仪器进行自检。约1分钟后自检结束,窗口显示主菜单: Run Enter List Edit Files Setup 。 二.将装有样品的已经封口的离心管或96孔板放入相应的Block。 三.编制程序:1.将光标移至主菜单中“Enter”处,按“Proceed”键,输入程序的文件名,用左右箭头键变换英文字母,按“P ...
Role of Rho Rac and Rho-kinase in phosphorylation of myosin light chain development of polarity and spontaneous migration of Walker 256 carcinosarcoma cells. As previously shown constitutive activatio ...
关于293/293T细胞 1、种属都为人,不是鼠。 2、来源:293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋 ...
CHO-K1 (hamster Chinese ovary) ECACC 85051005 Morphology: Epithelial Hamster Chinese ovary Depositor: Dr D Newell PHLS CAMR Porton Down Salisbury UK No restrictions. Patent: None Specified By Deposito ...
This protocol is for use with the D cyclins and employs 488 nm argon laser excitation of propidium iodide and 630 nm NeNe or diode laser excitation of the fluorochrome Cy5 to detect cell cycle-specifi ...
酵母表达方法
1.Add 100 l of well-mixed anticoagulated whole blood to the bottom of a labeled tube. 2.Add the appropriate primary antibody to each tube. If using unlabeled antibody a titration is suggested. Conjug ...
树突状细胞(DendriticcellDC)是机体免疫系统中最强有力的一种专职的抗原呈递细胞(APC)在免疫应答的启动、调控上起着关键的作用。现代抗肿瘤免疫疗法利用DC负载肿瘤相关抗原(TAA)制成的肿瘤疫苗(瘤苗)在转移性前列腺癌、恶性黑色素瘤、多发性骨髓瘤和慢性髓性白血病(CML)等几种恶性肿瘤的治疗上已取得喜人的效果。现对树突状细胞的生物特性、来源、抗瘤机制、肿瘤疫苗疗法等进行综述。1 DC ...
首先,它肯定不同于原代细胞系的,最大的区别,原代的心肌细胞基本不能分裂,而H9C2可以分裂,最大的区别了吧!原代心肌细胞会跳动,你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的,但是H9C2来源于胚胎期心脏,而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。 H9C2与原代心肌细胞有那么大区别,当然不能替代它,所以在研究方向上,你要根据自己的实验需求选择自己合适的细胞,一般来讲呢,如果你研究与心脏相关的信号通路,我建议你还是选 ...
Human Astrocytes Astrocytes make up the majority of the cells in the mammalian brain. They are the most variable in type most intimately associated with all parts of neurons and thus most functionally ...
酵母基因组的抽提方法
PCR原理 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的作用下,以单链为模版,根据碱基互补配对原则复制成新的单链,与模版配对成为双链分子挎贝。在体外实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计与模板DNA的5’端结合的两条引物,加入DNA聚合 ...
A general protocol for staining cell for cytometry analysis General Annexin V Staining Procedure Solutions 1.10X Binding Buffer (Cat. No. 66121A):0.1 M HEPES pH 7.4; 1.4 M NaCl; 25 mM CaCl 2 . Di ...
第一节 概念及意义 一、概念 人类疾病的动物模型(animal model of human disease) 是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。 动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂,以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制,推动医药学的发展来之缓慢,临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性,而且许多实验在 ...