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当从一种类型的化学合成方法改变为另一种类型后，清洗自动DNA合成仪上的所有管道是非常重要的。否则就会导致DNA合成失败。具体方法如下： 1)按照正常方法更换所有必要的试剂。 2)将用过的合成柱装在合成仪上每个柱的位置。 3)在每一柱位置都输入合成片段AGCTT序列。 4)根据合成方法按照TritylOnManual结束方法进行合成。 5)在假合成结束后，弃去旧合成柱，开始寡核苷酸合成。 ...

化学合成方法与生物化学方法之间有着显著的差别，材料和方法上非常小的改变常常会在所获得的产物以及保证可靠的合成路线之间造成差别。下面介绍几个最可能引起故障的经验问题。 1．溶剂 大多数用在化学合成中的商品试剂都不够纯。因此使用前应该进行纯化(常用方法：蒸馏)。对于“专为合成DNA纯度”的溶剂也要检查其颜色(几乎所有的液体都是无色的)及透明度(颗粒将阻塞多孔玻璃，分子筛尘埃将造 ...

操作步骤 1、设置温度 按一下up或down键，显示屏将由亮到暗开始闪烁，此时显示的是上次设置的温度。如需改变，则通过up或down键来上调或下调。停按5秒钟后，数字停止闪烁，并开始显示炉内温度。（第一次使用前需要至少24小时来稳定加热器。） 2、校准 需要校准显示温度与实际温度是否一致。将一枝标准温度计置于样品附近，稳定1小时后，比较2者的数值是否一致。 如需校准，则同时按住up和down键直到 ...

1、本仪器分上下两箱，上箱为杂交箱，下箱为交联仪。2、杂交箱使用方法：打开箱门。如有需要，可旋松夹具的固定螺钉，根据所用杂交管的长度（150mm或300mm）调整夹具的间距，然后旋紧螺钉。再将管对称地安置到夹具上，以保持平衡。打开仪器电源（Power开关），如有需要，可用Temperature Control下的箭头键调整温度（注意！管的使用温度不能超过70℃），打开Motor Con ...

一 关于融合槽：使用方法为：先连接电极线，然后将缓冲液加入电极中间，最后在融合仪上面设置参数，触发。 二 关于连接线：45-0216 连接线有黑色和红色两条，结构如下：一头是可伸缩香蕉头，一头是可伸缩钩头。请按照线的颜色，将可伸缩香蕉头插入对应颜色的融合仪电压输出口中。可伸缩钩头分别直接钩住融合槽中的两个金属头即可，不分正负极。 三 关于融合仪的设置和操作： 前面板控制介绍： 按动PO ...

JCF-型细胞电融合仪的各项技术参数是通过大量的融合实验数据，并参考岛津公司(日)SSH型电融合装置的参数值而设计的。当打开电源，指示灯亮，并拨通输出开关和正弦输出开关，选择和按下正弦频率按键(共分为0.6、0.8、1.3、1.5MHz五档)，此时将输出电缆与示波器相接，在示波器上即出现高频正弦波形，当左右旋转正弦幅度旋钮，则正弦电压的p-p值，也随之降低和升高，如果将输出电缆与电融合室相接，则细 ...

设置参数： 旋转参数调节旋钮来调节箭头所在的位置，来选择需要修改参数的地方。按一下旋钮，选择该参数项，再旋转旋钮来调节参数大小，调好后，再按一下旋钮，返回到参数设置界面。在选择其他需要修该的参数。基本上所有参数都是这样设置的。 可以设定的参数有：电压，脉冲宽度，脉冲次数。 保存程序： 在设置好参数后，选择“SAVE”，按住旋钮不放，直到出现新的界面：“saved ...

1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115μm ，这种通道能维持几毫秒到几秒，然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微 ...

虽然PCR仪器不是一种计量仪器，但其主要作用原理与基本计量要素密切相关，要求较高，一旦失控，仪器将不能正常工作，所以PCR仪器也需要定期检测和维护，这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。 在仪器的维护保养中，需要注意以下问题： 1)PCR仪器需要定期检测，视制冷方式而定一般半年至少一次。 2)PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的，当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1&mdas ...

1、新建文件菜单File → New，Assay选择Absolute Quantification（实时定量模式），打开一个空白的96孔板文件。 2、探针设置双击任意一个孔，打开Well Inspector窗口。该窗口也可以从菜单View → Well Inspector打开。 3、首次使用软件，或者探针（Detector）没有设置好，请点击Add Detector按钮，打开D ...

定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指数级放大。至于荧光检测系统，多色多通道检测是当今的主流趋势&m ...

开启PCR仪电源至ON 位置；屏幕显示版本信息后，出现step to edit file# 。 SOAK file# 的编辑： file# 是在某一温度下持续无限长时间，即只可修改温度。按 file →→Enter键；显示SOAK temperature （0-00） ℃；可根据实验需要修改温度，如要0℃，按，0，再按Enter键，显示End of file，RUN-STORE ...

一．打开电源，仪器进行自检。约1分钟后自检结束，窗口显示主菜单： Run Enter List Edit Files Setup 。 二．将装有样品的已经封口的离心管或96孔板放入相应的Block。 三．编制程序：1．将光标移至主菜单中“Enter”处，按“Proceed”键，输入程序的文件名，用左右箭头键变换英文字母，按“P ...

Role of Rho Rac and Rho-kinase in phosphorylation of myosin light chain development of polarity and spontaneous migration of Walker 256 carcinosarcoma cells. As previously shown constitutive activatio ...

关于293/293T细胞 1、种属都为人，不是鼠。 2、来源：293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋 ...

CHO-K1 (hamster Chinese ovary) ECACC 85051005 Morphology: Epithelial Hamster Chinese ovary Depositor: Dr D Newell PHLS CAMR Porton Down Salisbury UK No restrictions. Patent: None Specified By Deposito ...

This protocol is for use with the D cyclins and employs 488 nm argon laser excitation of propidium iodide and 630 nm NeNe or diode laser excitation of the fluorochrome Cy5 to detect cell cycle-specifi ...

酵母表达方法

1.Add 100 l of well-mixed anticoagulated whole blood to the bottom of a labeled tube. 2.Add the appropriate primary antibody to each tube. If using unlabeled antibody a titration is suggested. Conjug ...

树突状细胞(ＤｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌＤＣ)是机体免疫系统中最强有力的一种专职的抗原呈递细胞(ＡＰＣ)在免疫应答的启动、调控上起着关键的作用。现代抗肿瘤免疫疗法利用ＤＣ负载肿瘤相关抗原(ＴＡＡ)制成的肿瘤疫苗(瘤苗)在转移性前列腺癌、恶性黑色素瘤、多发性骨髓瘤和慢性髓性白血病(ＣＭＬ)等几种恶性肿瘤的治疗上已取得喜人的效果。现对树突状细胞的生物特性、来源、抗瘤机制、肿瘤疫苗疗法等进行综述。1　ＤＣ ...