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DNA Fragment Purification from Agaro

DNA Fragment Purification from Agarose or Acrylamide For fragments from 200 bp to 10 kb the agarose purification is ideal.For smaller fragments (20 bp to 400 bp)the acrylamide purification is preferre ...

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molecular cloning

A gl ...

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Plasmid Subcloning

Purpose: The method is used to clone smaller portions of inserts (up to 15 kb in size) which previously have been cloned in YACs phage cosmids or other plasmids. Time required: &nbs ...

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About aza-cytidine-DNA Methylation, Histone and C

HiI'm starting to work whit 5' cytidine on plants. I want to know if it's possible to prepare a stock solution to store it at -20C. In that conditions the drug lose the desmetilant capacity?I've wrote ...

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Genomic DNA Extraction for Mapping

1.grow plants in trays of 96 and leave two spots open (for the PCR controls) 2.harvest 1 to 2 young and green leaves (1cm2 /plant at rosette stage if possible). Use 96 well plates (1 or 2ml E&K p ...

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真菌DNA提取(Lazo Lab)

Saghai-Maroof MA Soliman KM Jorgensen RA & Allard RW (1984) PNAS 81:8014-8018 DNA successfully isolated from fungal species of Cochliobolus Aternaria and Fusarium. The key elements in this prep ar ...

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酵母质粒的提取

Pick colonies into 0.5ml of SD-Leu (or other appropriate SD medium) Vortex for 1min Leave to grow O/N for 18-24h at 30℃ 230-250rpm (best in 5ml bijou) Spin yeast culture at 13000rpm for 5 min (microfu ...

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Role of TRIS in DNA extraction-Molecular Biology

i want to know why exactly tris is used as a buffer when we can use any inorganic salt also to reach pH 8 so what is the function of tris? ------------------------------------------------------------ ...

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In vitro transcription with yeast nuclear extract

Steve Hahn Last Modified FriApr 252003 Wear gloves throughoutuse RNAse free solutions (either autoclaved or sterile filtered)and clean bench and pipetmen with 95% ethanol before use to eliminate any s ...

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Southern Blotting(Fred Hutchinson Cancer Research Center)

DNA Transfer1. Depurination of DNA fragments: Wash gel in 0.25 M HCl 5' (small gels) 7' (large gels) 2. Denaturation: Wash gel in (0.5 M NaOH 1.5 M NaCl) for 20' (small) to 30' (large). 3. Neutralizat ...

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ES CELL DNA EXTRACTION

Protocol f ...

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基因诊断原理

&nbs ...

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DNA扩增标准化操作规范

1 目的 ...

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基因诊断技术的选择

关于如何选择基因诊断技术有两层含义:第一,什么情况下选择基因诊断;第二,如果选择了基因诊断,应当采用哪一种基因诊断技术。以下分别介绍。1.选择基因诊断的依据。 (1)基因诊断可以弥补免疫学检测技术的缺陷 免疫学诊断主要依赖于抗原抗体反应,应用于临床只能在体内产生抗体以后,也就是病程的中期及晚期,不能应用于早期诊断,往往由于地区的流行及 ...

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DNA的纯化浓缩与定量

实验目的 将复杂的细胞分子混合物加入有机溶媒萃取以除去蛋白质及其它成分,就可以纯化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白质变性(denaturaion)的特性来进行萃取的步骤,DNA和RNA不溶于有机溶媒中,而溶于水层。另外,分子选殖(molecular cloning)常利用洋菜胶(agarose)来分离不同大小的DNA片段或用以纯化DNA。 核酸定量可利用核酸会 ...

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石蜡包埋组织DNA的提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。   医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织,是一个可靠的分子生物学研究的材料来源。在石蜡切片上进行原位杂交或原 ...

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质粒提取

一、导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA,这些方法都含有以下3个步骤: 细菌培养物的生长。 细菌的收获和裂解 质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长 ...

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Southern印迹

【原理】 Southern 印迹是将电泳分离的 DNA 片段转移到一定的固相支持物上的过程。 DNA 分子经限制性核酸内切酶酶切,经琼脂糖凝胶电泳将得 DNA 片段按分子量大小分离,然后将含 DNA 片段的琼脂糖凝胶变性,并将单链 DNA 片段转移到硝酸纤维素膜或其它固相支持物上,而各 DNA 片段的相对位置保持不变,这种滤膜可用于杂交反应。利用 Southern 印迹法可进行克隆基因的酶切图 ...

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