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Possible Causes: Components · Primer concentration is too low. · Primer concentrations not balanced. Make sure primers arepresent in equal concentrations. · New primers are requir ...

PCR产物克隆大致分为两类，即平头连接和粘头连接。 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头；PCR产物纯化后，可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min（利用该酶所具有的3’→5’外切酶活性和5’→3’的聚合酶活性）。如果要求不高，PCR产物也可不加处理。如果使用 ...

一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有1、模板核酸的制备2、引物的质量与特异性3、酶的质量及4、PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：1、模板中含有杂蛋白质2、模板中含有Taq酶抑制3、模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白4、在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚5、模板核酸变性不 ...

颞叶癫痫模型的建立及其相关研究 杨忠旭1 栾国明2 张颖3 (1首都医科大学北京天坛医院神经外科，北京100050; 2卫生部北京医院神经外科，北京100730; 3北京市神经外科研究所，北京100050) 摘要　目的　通过立体定向手术建立大鼠颞叶癫痫模型，并对模型的电生理和永久癫痫敏感性的病理学基础进行研究。方法　按公斤体重计算的海仁酸立体定向手术一次性注入大鼠的海马组织，于术后不同时间观察大鼠 ...

压条法是使大树上某部分枝条生根后离开母株的繁殖方法。 (一)水平压条 可利用1—2年生多余的枝条，也可用当年生的新梢或副梢进行压条育苗。用1年生成熟枝条压条育苗，在头一年冬剪时，留下母株基部附近的萌蘖枝，翌春萌芽前进行压条。首先在准备压条的植株附近挖一深10一15厘米的沟，沟底施肥、深翻，使土壤疏松。然后将留用压条的枝条下部刻伤处理后，水平压在沟底，并用木权或铁钩固定后， ...

春季将贮藏的枝条从沟中取出后，先在室内用清水浸泡6—8小时，然后进行剪截。一般把枝条分别剪成有2—3芽的插条。插条一般长20厘米左右，节间长的品种每个插条上只留1—2个芽。剪插条时上端在芽上部l厘米处平剪，下端在芽的下面斜剪，剪口呈“马耳状”(剪口距芽眼近时易生根)。插条上部的芽眼要充实饱满，扦插后如第一芽眼受损害，第二芽眼即可萌发，这鲜 ...

一、植物 竹节秋海棠（B.President－carnot） 二、材料类别 叶片、叶柄、茎段 三、培养条件 以MS为基本培养基。诱导愈伤组织培养基：（1）MS＋BA3——5mg／L（单位下同）＋NAA0.1——0．5。丛生芽增殖培养基。（2）MS＋BA1．0＋NAA0.1。（3）MS十BA0.5十NAA0.1。（4）壮苗培养基： ...

一、材料 试验材料为经增殖培养（MS＋6－BA0．2＋IBA0．1＋糖3％）和生根培养（1／2MS＋6－BA0．15％＋糖2％）的试管苗。苗高3cm以上，具有3片以上完全叶。 二、方法 （一）培育壮苗 将经生根培养40d后的幼苗，转移到壮苗培养基上，培养基配方为1／2MS＋6－BA0．05 ＋IBA0．2＋糖2．5％，给以2000——25001x的光照每天12小 ...

鹤望兰又名天堂鸟，为市场紧俏名贵切花。分株法是鹤望兰的最佳繁殖法。 一、母株的选择。母株应选分蘖多、叶片整齐；无病虫害的健壮成年植株。用于整株挖起分株的母株一般选择生长3年以上的具有4个以上芽、总叶片数不少16枚的植株。分株后用于盆栽的可选择有较多带根分蘖苗的植株。 二、分株时间。无论是栽植于大棚内的。还是大田苗用于盆栽的。适宜时间均为5—6月份。 三、分株方法。 1、不保留母株分株法 ...

水稻、小麦、高粱、玉米等禾本科植物，没有形成层，无法使用一般嫁接方法，须用种胚嫁接法进行嫁接。种胚嫁接法是将一个禾本科植物的胚切下来作接穗，嫁接到另一禾本科植物的胚乳（砧木）上，使其萌发生长成1株嫁接苗。种胚嫁接法的方法步骤如下。 浸种 将用作接穗和砧木的种子，同时放入清水中浸种半天，使种子吸水膨胀。浸种时间不能过长，否则会使胚乳变软而不易切胚。 催芽 将浸种后的种子放入培养皿中的湿滤纸上，置于2 ...

靠接是特殊形式的枝接。其方法步骤如下。 (1)使接穗和砧木靠近。嫁接前，应将接穗、砧木中的一方，种植于花盆中（或二者均种植于花盆中）。嫁接时，按嫁接要求将二者靠拢在一起，作好嫁接准备。 (2)削接穗和砧木。选择粗细相当的接穗和砧木，并选择二者靠接部位。然后将接穗和砧木分别朝结合方向弯曲，各自形成“弓背”形状。用利刀在弓背上分别削1个长椭圆形平面，削面长3～5厘米，削切深度为 ...

又称对接。适用于砧木直径1厘米左右、且砧木、接穗粗细大体相同的嫁接。舌接方法比较复杂，但切口接合紧密牢固。其具体方法步骤如下： (1)削接穗。在接穗的下芽背面削成3厘米长的斜面，然后在削面的下三分之一处，与削面接近平行往上劈，劈口长约1厘米，成舌状。 (2)削砧木。在砧木的上端削成3厘米长的斜面，在削面的上三分之一处，与削面接近平行往下劈，劈口约长1厘米。 砧木和接穗的斜面部位要相对应，以便于互相 ...

又称插皮接。是操作简便容易掌握的一种枝接方法。用于木本植物时，可在生长季节树液流动时期进行（这与劈接法和切接法不同），嫁接的方法步骤如下： (1)削接穗。选取生有2～4个饱满芽的接穗。将其上端剪平后，在下端芽的下部背面，一刀削成约3厘米长的平滑大斜面，并在削面两侧轻轻各削一刀，削去一丝皮层，露出里面的形成层。然后在大切面下端背面，再削约0.6厘米长的小斜面。用湿布包好备用。 (2)砧木开口。在砧木 ...

切接是常用的枝接方法，适用于直径1～2厘米粗的砧木，而且嫁接后接穗只有1个。其嫁接方法步骤如下： (1)削接穗。切接用的接穗，其质量要求与劈接相同。但其下端不能削成楔形斜面，而要在接穗下端没有芽的一面，斜削一刀，削去三分之一的木质部，斜面长2厘米左右，再在斜面背面，斜削一小斜面，稍稍削去一些木质部。小削面长约0.8～1厘米。要注意接穗的两个削面必须平滑，绝不可有丝毫凸凹或发毛之处。接穗削好后用温布 ...

劈接是最常用的枝接方法，既用于果树花木，也用于草本花卉和瓜类蔬菜。在果树花木方面，它适用于直径2～3厘米砧木的枝接。现将果树花木的劈接方法步骤说明如下。 (1)削接穗。将采来的接穗去掉梢头和基部叶芽不饱满的部分，截成5～6厘米长，生有2～3个饱满叶芽。然后在接穗下芽3厘米左右处的两侧削成一个正楔形的斜面，削面长2～3厘米。如果砧木较细只能插1个接穗时，则应削成偏楔形，即外侧稍厚，内侧稍薄。 接穗削 ...

本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml，总量为6滴，相当于0.12ml。 1．抗原 系各型菌株培养物多价抗原，按瓶签说明倍数稀释。 2．溶血素 正式试验时使用2个工作单位。 3．补体系冻干补体 用灭菌生理盐水作1︰5基础稀释。在溶血素效价测定和补体效价滴定时均作1︰60稀释，在正式试验时，用2个工作单位。 4．1％的红血球悬液，用灭菌生理盐水洗涤与配制。在使用时与等量含2个 ...

芽接是用芽作接穗进行嫁接。和枝接相比，芽接节约接穗，1个芽就能繁殖成1个新植株；对砧木要求不粗，一年生的苗子就能作砧木进行芽接；嫁接时间长，从6月到9月间都可以进行嫁接；操作简便，容易掌握，成活率高。因此，芽接比枝接应用广泛，适合中学生开展嫁接活动时使用。 芽接因形式不同，分为芽片接、哨接、管芽接和芽眼接等不同方法，其中以芽片接应用最广。 “T”形芽接法 又称盾状芽接法。其 ...

木本植物砧木准备 木本植物在进行一般栽培上的嫁接时，砧木须于1年或2～3年以前播种。如果想使砧木影响接穗，则须于4～5年乃至5～6年以前播种，其具体年数，因各种树木的初花年龄而异。如果想以接穗影响砧木，则砧木需要年轻，于1～2年前播种即可。 木本植物在嫁接时，如打算嫁接后用土覆盖，须事先将砧木两旁，挖开7～10厘米深的土壤。进行木本植物芽接时，如果土壤干燥，应在前一天灌水，增加树木组织内的水分，以 ...

选株选花 选择性状典型、纯度高、生长良好的棉株作为母本株，在母本株上，选择中部果枝上靠近主秆第一、二节位的正常花作为杂交花朵。 去雄 (1)去雄时间。适宜的去雄时间是开花前1天的下午3点左右。判断花朵次日开放的标志是花冠已经长大，已经伸出于副萼之外。这样的花，第二天早晨即可开放。 (2)去雄方法。棉花去雄常用的方法有徒手去雄和工具去雄两种。 ①徒手去雄。是用手将花冠和雄蕊管一起撕去，只保留雌蕊。操 ...

将父、母本按一定行比种植在隔离区内，并将母本雄穗全部拔去，使其自由授粉，这种人工杂交方式，称为隔离杂交。 选择自交系 用来杂交的两个自交系，应该是经过测交，证实其第一子代的杂种优势明显，属于优良杂交组合。玉米自交系可向当地生产部门购买。 播种 父、母本在一块地里按2行母本1行父本的行比相间种植，其四周至少500米以内不种与父本不同的品种。形成隔离区。播种时应将亲本之一提前或延迟播种，以使父、母本花 ...