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水中溶解进任何物质，都会改变它的折光率，溶解的物质越多，溶液的折光率改变也越大。根据溶液折光率与溶质浓度的变化规律，可以用折光仪简便地测出水溶性淬火介质的溶质浓度。本文介绍的方法，可供从事热处理的工人和技术人员在生产中应用。 　　一、手持式折光仪的选择 ...

大鼠痛觉模型的建立分为下面几个步骤： 1、领取SD雄性大鼠，体重200-220g为宜；2、试验前测试痛阈（作者采用仪器为意大利Ugobasile的heat-flux meter测痛仪），痛阈极端大/小的挑除不用；3、试验前至少3天每日上午9点－9点半将大鼠放入观察笼中适应环境；4、试验时用微量注射器抽取100-200ul甲醛（浓度可自己定）于大鼠下肢脚掌皮内注射，注射后留置针头约30－60秒；5、 ...

基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应 ...

（一）预备试验 1．绵羊红细胞悬浮液的制备 通常用公绵羊红细胞，将绵羊血液采集于带有玻璃珠的无菌容器中，充分振摇，使脱去纤维，此时血液失去凝固性，称脱纤血。 亦可用阿氏液保存血液，阿氏液配方如下： 葡萄糖 24.60g 氯化钠 5.04g 柠檬酸钠（含2个分子结晶水） ...

革兰氏染色是细菌鉴定上一个最重要和广泛应用的方法。根据此法染色结果可将细菌分成两大类。一类细菌能够保留初染色剂（结晶等）于细胞中，不受脱色剂（酒精）的影响，而最后细菌被染成紫色或深蓝色者称为革兰氏阳性（Gram-positive）；另一类细菌可因脱色剂的作用而洗出结晶紫，然后被另一染色剂（藏红花）染成红色，称为革兰氏阴性（Gram-negative）。也有一些菌种革兰氏染色是可变的。 【实验目的】 ...

简单染色通常只用一种染色剂，使细菌整个细胞染上颜色。但看不清结构。所以只便于检查细菌的形态、大小和排列方式等。 【实验目的】 1、掌握单染色的操作技术 2、观察细菌的基本形态 【实验原理】 单染色即用单纯的种染料进行染色，多数采用美蓝、结晶紫或石碳酸复红等碱性染料。此法仅能显示细胞的外部形态，而不能辨别其内部结构。 染色前必须将细胞固定，其目的是杀死细菌，并使它粘附在载玻片上。此外，还可以增加菌体 ...

园友sakuyaandy： 我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养，如果没有的话，用厌氧瓶或厌氧缸都可以。培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸不过这都是培养用的培养基如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用，具体文献名称为 园友jerrycs： 厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，其生理 ...

胰腺炎动物模型是研究胰腺炎发病机制及探讨临床治疗的最好的方法但是由于不同类型的胰腺炎间其发病机制不同对胰腺炎的发病机制还不清楚所以没有一种很好的动物模型可以模拟人的胰腺炎。但自1856年Busnar-do等以胆汁和橄榄油混合液注射犬胰管成功地诱导急性胰腺炎模型以来经过一个多世纪的探讨胰腺炎动物模型的制备方法主要有以下几种。1.牛磺胆酸钠造模1）模型建立方法:大鼠于术前12h禁食自由饮水戊巴比妥溶液 ...

脑肿瘤目前仍是严重威胁人类健康和生命的疾病，而肿瘤实验动物模型的建立为研究其发病机制、生物学特性和检测各种治疗方法提供了一种高模拟性工具。自上世纪以来，先后建立了化学物质诱发脑肿瘤模型、病毒诱发模型、同种以及异种移植模型，随着现代分子生物学技术的发展，转基因动物模型又将成为人们研究的热点。 一、早期脑肿瘤动物模型及其局限性 （一）自发性脑肿瘤动物模型 脑肿瘤在哺乳动物中的发病率不一，有报道狗为0 ...

高血压模型的建立可以用儿茶酚胺类或其它体液加压物质注射来形成，但是这类模型造成的高血压时间短，不适于长时间的研究。因此如果要进行长时间深入的研究则应复制慢性实验性高血压模型。除遗传性高血压动物模型较能模拟人类高血压病的自然过程外，其它各类慢性实验性高血压动物模型（如神经原型、肾型、内分泌型和饮食型等），大多要经过一定的手术、药物或其他附加因素处理，与人类高血压病的临床不完全一致，但是对于筛选有效降 ...

一个脑缺血动物模型的成功建立，对于临床前心脑血管药理的研究具有重要意义。一个理想的脑缺血及再灌流动物模型应具备以下条件： （1）血管闭塞后能引起相应区域血流量改变。（2）病理改变接近人脑急性缺血性变化。（3）大脑缺血严重，但脑干活动尚能维持，有利于缺血再灌流的连续观察。（4）闭塞动脉的方法能进行重灌注。（5）重复性好。（6）可控制缺血的时间，制成轻重不等的缺血模型。 常用方法： 1.开颅法：多数选 ...

造模原理：利用外源性化学致癌因素引起细胞遗传特性异常，呈现出异常生长和高增值活性，形成癌症。常用的致癌物质有：DEN（乙亚硝基胺）、DBA（4-二甲基氨基偶氮苯、2AAF（2-乙酰氨基酸）、OAAT（亚胺基偶氮甲苯）和黄曲霉素等。 1、DEN诱导：取体重250g左右的封闭群大鼠，雌雄不限，喂养普通饲料，随意饮水，给与0.25%的DEN水溶液0.25~1mL灌胃或稀释10倍放在饮水瓶中自由饮水，剂量 ...

目的:用氯化锂—匹鲁卡品制备Wistar 大鼠癫痫模型探讨匹鲁卡品合适的用量及用法。方法: Wistar 大鼠腹腔注射氯化锂3 mmol / kg 24 h 后给予不同剂量的匹鲁卡品腹腔注射。结果:40 mg/ kg 组和30 mg/ kg 一次注入组的持续性癫痫大发作(SE) 出现率和死亡率均为100 % 慢性复发性癫痫(SRS) 模型成功率为0 %; 30 mg/kg 分3 次 ...

一、关于如何计算IC50 1、改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4) Xm:lg 最大剂量&nb ...

聚合酶链反应即PCR技术，因为其对基因或特定核酸序列在短时间内的极大的扩增效率，已在感染性疾病、肿瘤、遗传病、寄生虫病、法医学、动植物和考古等的诊断和研究中得到了广泛的应用，并在某些方面几乎是难以替代的。但是，像自然界的任何事物一样，PCR也有其局限性，稍不注意，就很容易造成错误的判断。 感染性疾病由病原微生物引起，主要有病毒、细菌、衣原体、支原体和螺旋体等，在PCR出现以前，这些病原体通常采用培 ...

1、基本要素和扩增原理 基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。待拷贝的 DNA 称为模板，它可以是双链 DNA 也可是单链DNA，最后扩增得到的产物是双链状态的。引物是 DNA 复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。DNA 聚合酶是 DNA 复制的动力，在 dNTP 等底物存在时在引物的引导下沿着模板 DNA 合成互补的 DNA ...

PCR过程中如果没有找到最佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物，有时甚至没有目的产物；而在另一个极端，又可能没有扩增到任何产物。这时改变已知对引物－模板的忠实性和引物延伸有影响的诸多参数中的一两个，将会达到优化扩增的目的。其中最主要的优化变量包括 Mg2＋浓度、缓冲液pH值和循环条件，在循环条件中又以退火温度最为重要。 1、降落PCR 降落PCR代表了一种完全不同的PCR优化方法，它 ...

PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带　 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多 ...

PCR技术的发明 1983 Kary Mullis 发明 1985 开始有文章发表 1993 获诺贝尔奖 广泛用于分子生物学研究领域 变性--退火--延伸三个步骤 1、模板DNA的变性：93℃-95℃左右 2、模板DNA与引物的退火(复性)：Ta=Tm-3~5 ℃ 3、引物的延伸：Taq DNA聚合酶之5’-3’DNA聚合酶活 ...

问题1：无扩增产物 现象：正对照有条带，而样品则无 原因: 1、模板:含有抑制物，含量低 2、Buffer对样品不合适 3、引物设计不当或者发生降解 4、反应条件：退火温度太高，延伸时间太短 对策: 1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2、更换Buffer或调整浓度 3、重新设计引物（避免链间二聚体和链内二级结构）或者换一管新引物 4、降低退火温度、延长延伸时间 问题2：非特 ...