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培养细胞应该养成的一些好习惯

"Hot Start" PCR: In certain circumstances one wishes to avoid mixing primers and target DNA at low temperatures in the presence of Taq polymerase: Taq pol is almost as efficient as Klenow po ...

Recommended Reaction Conditions: Initial Conditions: Initial denaturation at start: 92 - 97oC for 3 - 5 min. If you denature at 97oC denature sample only; add rest of mix after reaction colls to annea ...

目的 观察D-半乳糖连续皮下注射对小鼠皮肤衰老指标的影响。方法 3月龄KM雌性小鼠60只随机分为空白对照组(注射生理盐水)、D-半乳糖低剂量组(80 mg/kg)和D-半乳糖高剂量组(1000 mg/kg)连续每日背部皮下注射42天后观察小鼠皮肤中与衰老相关的生化指标及组织病理学变化并用计算机图像分析系统定量分析。结果　高剂量组小鼠真皮厚度〔(624·5±48&mid ...

PCR和RT－PCR常见问题及解答 ...

标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 　 10ul 4种dNTP混合物 　 各200umol/L 引物 　　　　 　 各10～100pmol　& ...

1、引物 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则：　　①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。　　②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。　　③引物碱基：G+C含 ...

一、聚合酶链反应的历史回顾 1、核酸体外扩增最早的设想 由Khorana及其同事于1971年提出：“经过DNA变 性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重视该过程便可克隆tRNA基 因”。但由于当时很难进行测序和合成寡核苷酸引物，且当时(1970年)Smith等发现了 DNA限制性内切酶，使体外克隆基因成为可能，所以，使Khorana等的早期设想被人 们遗忘。 ...

快速老化模型小白鼠(Senescence Accelerated Mouse，SAM)由日本京都大学竹田俊男教授经20年近代延交培育而成，具备均一的遗传背景和稳定老化病态特征。SAM品系中，P8和P10除具有P品系的一般老化症状外，伴快速老化自然出现学习记忆力障碍和低恐怖低紧张状态，为脑老化痴呆模型小白鼠；其共同点是均具有认知障碍，且在渡过生长期后(4-6月)，伴快速老化自然发生，与临床痴呆的渐进 ...

一、基本原理 溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔，四天后将小鼠杀死，取脾脏制成脾细胞悬液，内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞，补体混合孵育。由于PFC所分泌的抗体和绵羊红血球结合形成抗原抗体复合物，在补体作用下可使红细胞溶解，于特制的小室内形成肉眼可见的溶血空斑。 ...

一、实验原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细胞毒试验可以检查细胞膜抗原，亦可鉴定抗体的特异性。 本实验中，Thy-1抗原是小鼠胸腺T细胞特异 ...

目的：建立家兔饲养规程，确保家兔按国家科委条例饲养使用。 应用范围：所有的家兔。 内 容： 1、工作人员更换衣、帽、鞋，戴上口罩后，进入饲养间。 2、记录饲养室温度、湿度。 3、饲养方法 可采用两种。一是自由采食，将全价饲料、饮水全部备人饲槽中，任兔采食，料草水槽中保持不断。二是定时供给，将各种饲料按时按次序供给，先粗后精，先干后湿，先喂后饮。成年兔 ...

眼下，正是家兔生长繁育的好时机。但是炎热天气，各种病菌和寄生虫也易滋生，家兔容易中毒及发生各类胃肠疾病。尤其是对仔幼兔的威胁更大，如果饲养管理不当，会使死亡率增高。 因此，为保证养好家兔，必须加强日常管理，搞好卫生防疫工作。 草要洁青饲料要洁净，拣除线绳、塑料薄膜等异物，洗净沥水，晾干后再喂。割青草喂兔时，要禁喂一切不认识或怀疑有毒的植物。做到不喂带泥土的草，不喂腐烂变质草，不喂雨水草、露水草，不 ...

雄性：体重（g） 日龄<12g <2313～15g 24～2816～18g 29～3519～21g 36～4522～24g 45～63雌性：体重（g） 日龄<12g <2313～15g 24～3116～18g 32～5219～21g 53～7722～24g 78～105 ...

夏季家兔常因炎热而吃食减少，抗病力降低，尤其仔兔、幼兔的球虫病发病率高，危害很大。 1、降温防暑 夏季兔舍要求遮光通风，防日光直射。室内兔舍通风良好，温度超过30℃时，可采用地面泼水降温；露天兔舍应搭设凉棚，种植南瓜或葡萄等，以遮阴防暑；平养兔舍地面可经常铺垫干沙等，也可放一张距地面8～10厘米的木板条床，让兔在上面休息，以防潮湿而发病。 2、精心饲养 夏季中午炎热，兔食欲不好。因此，每天应早餐要 ...

　提要　本实验旨在观察补体系统在有氧运动影响下的应答性特征及适应性变化，并解释变化的可能机理。受试者为16名未经运动训练的大学女生，连续从事有氧运动8周，结果发现，C3和C4几乎不受一次性负荷影响，且随有氧运动进行，在前4周逐步降低，第6周出现一过性回升，但随即跌至更低水平。表明机体在有氧运动初期有一个免疫低下期。这些现象与运动应激与适应过程中神经-内分泌-免疫网络的相互作用有关。 　　　关键词 ...

小 鼠 近交系 BALB/c来源：1913年，贝格(Bagg)从美国商人欧希尔(Ohio)处购得的白化小鼠原种，以群内方法繁殖。麦克•多威尔(MacDowell)在1923年开始作近交系培育，至1932年达26代，命名为BALB/c品系。安德尔文特(Andervont)等人使BALB/c广为传播和应用。1985年我国从美国NIH引进到中国医学科学院实验 ...

50%溶血试验即求得能使50%致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清，然后计算出每毫升血清中补体含量。 以补体量作为横坐标，溶血百分数作为纵坐标，可得到一个清晰的“S”形曲线。在50%溶血周围，线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动，就可对溶血程度发生很大影响。所以用50%溶血作为终点要比100%溶血更为敏感。 50%溶血试验定血清中补体含量用以下公式表示： 该公式可以从Von Krogh 方程 ...

绵羊红细胞（SRBC），与相应抗体（溶血素）结合后，可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关，但不是直线关系，而呈S曲线关系，故通常取反应曲线中间部位即50％溶血（CH50）为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途径，C1～9任何一种成分缺陷都可使CH50降低，所以此实验反映了总补体的活性。 材料 磷酸缓冲盐水( ...

脑室灌注β2淀粉样肽致痴呆动物模型楚　晋李　林(首都医科大学宣武医院北京老年病医疗研究中心药理研究室北京　100053) 摘要: 目的 建立脑室灌注β-淀粉样肽(Aβ) 致痴呆动物模型及观测指标。方法 微泵渗透对动物脑室进行灌注可溶性大片段Aβ侧脑室一次性注射聚集态小片段Aβ侧脑室一次性注射可溶性大片段Aβ片段侧脑室注射Aβ联用 ...