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火箭免疫电泳法测定补体C4、B因子

1.主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清:按说明书所示单扩效价扩大2—4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度。 (2)羊抗人B因子抗血清:按说明书所示单扩效价扩大3—5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度。 (3)电泳缓冲液:称取10.30g巴比妥钠,1.83g巴比妥,溶于1 000mL蒸馏水中。此液 ...

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补体各成分的测定方法

根据世界卫生组织(WHO)和国际免疫学会报告,30多种补体成分中通常只需检测C3、C4、Clq、B因子和C1酯酶抑制物等5种成分。 测定方法大致可分为免疫溶血法和免疫化学法。免疫溶血法主要根据抗原与其特异性抗体(1gM、IgC型)结合可激活补体经典途径,导致细胞溶解。抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体,即溶血素。二者在反应体系中称为指示系统。 使用的补体有两种,一 ...

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循环免疫复合物(CIC)的检测方法

循环免疫复合物(CIC)的检测方法大致可分为两类,即抗原特异性方法和抗原非特异性方法。前者通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原,选择性测定含有某种特定抗原的IC。在已知由某种抗原引起的免疫病理反应的疾病中,可应用此类方法。 抗原非特异方法,则不考虑形成IC抗原的性质,根据免疫球蛋白分子在结合抗原以后发生的物理学和生物学特性的改变进行检测。由于体内形成的CIC可能涉及多种抗原—抗体系统。 ...

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循环免疫复合物检测和血清乙肝病毒标志物间的关系

免疫复合物(IC)是抗原和相应抗体结合形成的复合物。正常情况下,体内产生的IC对人体是有益的,如病原体与相应的抗体结合形成的IC更易被单核细胞吞噬并清除。但如果IC因某些原因在体内不能被迅速清除,则会在局部沉积,激活补体,并在血小板、中性粒细胞参与下,引起一系列连锁反应。最后导致组织损伤,出现临床症状,称为免疫复合物病(ICD)。肝脏是产生单核-巨噬细胞的重要器官,绝大部分的IC形成后,均在肝内被 ...

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循环免疫复合物

抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物,免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合,沉积在血管壁,可导致组织损伤及血管炎,引起一系列的疾病,如红斑狼疮,由于免疫复合物能在循环血液中检测到,故称之为循环免疫复合物。 循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义,但对病情的活动性判断和指导治疗有一定价值,测定循环免疫复合物的方法很多,这里仅介绍临床常用的两种。 1、聚乙二醇法:循环免疫复合物与聚乙二醇作 ...

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Site-directed Mutagenesis using PCR

From: Molecular Biology: Current Innovations and Future Trends. Eds. A.M. Griffin and H.G.Griffin. ISBN 1-898486-01-8 1995 Horizon Scientific Press PO Box 1 Wymondham Norfolk U.K. In vitro site-dire ...

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仔兔的饲养管理

出生至断奶这一阶段的兔称仔兔。提高仔兔成活率,是提高养兔经济效益的重要一环。根据多年实践经验,要养好仔兔有以下几个方面: (1)饲养好带仔母兔,保持旺盛奶水,是养好仔兔的关键,俗话说:“养 好仔兔要有奶”。首先,分娩结束后,马上下班用人工拔光母兔腹部毛,使其奶头全部暴露出来,促使乳腺 通畅,分泌乳汁。根据理力争母兔体质,年龄,季节,泌乳等情况的好坏,调剂好只数,一般带仔4~ ...

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Single tube confirmation PCR protocol

The following colony PCR protocol has been designed to be performed in individual reaction tubes. We usually test three colonies from each transformation along with a wild-type control. A series of fi ...

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仔兔的饲养管理技术要点

一、睡眠期仔兔的饲养管理 (一)饲养方面 从仔兔出生到12日龄左右为睡眠期。睡眠期的仔兔,生长发育很快,初生体重仅50~60克,1周龄体重可增加1倍左右,10日龄体重可达初生重的3倍以上。因此,仔兔出生后应尽量让其吃上奶、吃足奶。特别是母兔产后1~2天内分泌的初乳,营养丰富而又具轻泻作用,有利于促进仔兔生长,排尽胎粪,养殖户应设法使仔兔尽早吃上。 (二)管理方面 睡眠期仔兔的管理要非常细致。实践表 ...

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细胞生物学实验技术

第二章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES 第一节显微技术 第一节显微技术 光学显微镜:以可见光(或紫外线)为光源。 电子显微镜:以电子束为光源。 一、光学显微镜 (一)普通光学显微镜 1、构成: ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 2、原理:经物镜形成倒立实像,经目镜进一步放大成像。 3、分辨力:指分辨物体最小间隔的能力。 R=0.61λ/N.A. ...

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提高仔兔成活率的关键措施

仔兔的死亡率较高,引起死亡的主要原因是饲养管理不当。因此,加强仔兔的科学饲养管理,对提高养兔经济效益十分重要。具体有五点关键措施。 1、早喂初乳,定时喂奶,喂足奶 仔兔出生后6~10小时内一定要吃到初乳,遇到不愿喂奶的母兔,应人工强制喂奶。做法是:将母兔固定在产箱或专门的哺乳箱内,由饲养员一手抓住母兔颈部,另一手抚摸母兔背部,使其保持安静,并将仔兔放到母兔乳头旁,让仔兔吸吮母兔乳头。连续几次后,母 ...

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仔兔不同生长时期的饲养管理技术

仔兔出生后,其生活环境发生了急剧变化,而此时仔兔的器官发育则尚不完全调节能力差,适应能力弱,很容易死亡。所以,必须采取有效的饲养管理措施,以提高仔兔的成活率。根据仔兔的生理特点,仔兔阶段可分为睡眠期和开眼期,这是仔兔生长发育阶段中非常重要而又很难饲养的时期。为提高仔兔的成活率,现将仔兔不同生长阶段的饲养管理技术要点介绍如下。 睡眠期仔兔的饲养管理 从仔兔出生到12日龄左右为睡眠期。刚出生的仔兔,体 ...

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Single Primer ("Semi-Random") PCR

Description Single primer PCR allows amplification from known to unknown regions in chromosomes phage plasmids large PCR products and other sources of DNA. At sufficiently low stringency any primer wi ...

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REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL

1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul 2、Primer 浓度,需要摸索,从200nM到700nm等,设置不同浓度。 3、每个引物浓度,从well 1到12设置4个样本,阳性cDNA 1和2,NTC以及H2O,做tripli ...

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Reaction volume

Q: Does the PCR reaction volume (negatively) influence the outcome? A: No especially since the introduction of the small thin walled 0.2 ml plastic vials fitting the 96 well metal blocks of the thermo ...

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脑梗死与循环免疫复合物的相关性研究

【摘要】 目的 探讨循环免疫复合物与脑梗死的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定脑梗死患者血中巨细胞病毒抗体(CMV-IgG与CMV-IgM)及衣原体抗体(CP-IgG),并与健康对照组比较。结果 脑梗死组循环免疫复合物显著升高(P﹤0.01),其中CMV-IgM在发病早期明显升高(P﹤0.01),随着病情康复,其水平逐渐下降。CMV-IgG和CP-IgG也呈现类似变化。 ...

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Hela细胞传代步骤

Hela细胞传代步骤 1.观察培养基是否正常,细胞状态如何,细胞密度如何,决定是否传代。观察时拧紧盖子。 2.加热PBS、versene、培养基,(提前做好) 瓶子不要倒着放,不要让液体接触到瓶塞。 3.打开超净台(先开风机,后开照明),用75%乙醇清洁台面,点燃酒精灯。不要把废液缸拿出去倒,如果废液太多,可以用其他容器先装废液。取小离心管一个,置于架子上。 ...

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Purification of PCR fragments for cloning(PCR克隆片段纯化)

After an aliquot of the PCR mixture is analyzed on an agarose gel the remainder of the reaction is concentrated by ethanol precipitation resuspended in buffer and subjected to a simultaneous fill-in/k ...

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细胞生物学历史与展望

细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。 细胞生物学由细胞学Cytology发展而来,Cytology是指对细胞形态(特别是染色体形态)的观察。 在我国的基础学科发展规划中,细胞生物学与分子生物学,神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。 第一章历史与展望 HISTORY AND PERSPECTIVE 第一节细胞生物学简史 细胞生物学的历史大致可以划 ...

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仔兔受冻急救措施

一、温水急救法 将40℃左右的温水倒入盆内,把受冻的仔兔全身浸泡在水中,仅露出鼻孔用来呼吸。然后用手轻轻地托起仔兔的头部,在温水中慢慢地晃动,经过10~20分钟,当仔兔开始蠕动时,将仔兔提出水面,把全身的水轻轻地擦干,用柔软的棉絮把仔兔包裹起来,放回到原来的产仔箱内。 二、毛巾包裹取暖法 用干净、柔软的毛巾将受冻的仔兔包裹好,只露出头部,然后把包裹好的仔兔放在炉火旁或装有温水的热水袋上,不断地翻动 ...

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