全部

宿主不一样，你要分离的噬菌体方法步骤也不一样，下面摘录部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤，仅供参考： 1、噬菌体分离　 (1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内放入37 ℃温箱培养24h。 (2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min 离心2000r/ 10min 上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。 (3) 在普通琼脂平板底面分别注明1、2、3 号。 (4)在1 号平板接 ...

采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同（主要是盐离子浓度不同）或反应温度不同，这时可以采用如下措施解决： 1）先用一种酶切，然后乙醇沉淀回收DNA分子后再用另外一种酶切； 2）先进行低盐要求的酶酶切，然后添加盐离子浓度到高盐的酶反应要求，加入第二种酶进行酶切； 3）使用 ...

λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径，其一是裂解生长，环状DNA分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次感染；其二是溶源性生长，即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体DNA中与之一起复制，并遗传给子代细胞，宿主细胞不裂解。平板培养时 ...

pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法： 测定噬菌体滴度 只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时（即细胞过量时），噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此，建议检测噬菌体贮液的滴度时，在感染前进行稀释，而不是在高MOI值的情况下稀释被感染的细胞。低MOI值有助于确保每个噬菌斑仅含一个DNA序 ...

一、实验目的与原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步： ①细菌的培养和质粒的扩增 ②细菌菌体的裂解 ③质粒DNA的纯化 本实验采取的菌体裂解方法为碱解法，质粒纯化方法为梯度离心法。 二、材料与试剂 1、材料：大肠杆菌 2、仪器：超净工作 ...

重组PCR是利用PCR法在DNA片断上进行定点突变，用PCR介导产生核苷酸的突变包括碱基替代、缺失或插入。 引物设计 通常引物中至少有15个碱基与靶序列相互补，而靶序列的3'-末端可以与任何添 加序列发生错配，单个碱基错配除引物3'-末端处3-4个碱基外，其他地方都可引入。 在PCR产物之间提供重叠的添加序列至少要有15个碱基，当然越和越好，这样它将使 重叠的杂合分子稳定。 原初PCR(Prima ...

步骤： 1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。 2、管中加入400微升TNE缓冲液；25%微升sarcosyl(硅鱼精)；75微升水；5微升蛋白酶K溶液手混匀，37度保温2小时。 3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干后管中取出再用12000rpm离心5分钟。 4、.移上清液(内含裂解细胞或雌性片段)于一新的15微升管，不要震荡沉淀物(内含非裂解细胞或精子)，再用TNE洗脱四次。 5、 ...

DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。本实验介绍的是ABI PRISM 310型DNA测序仪的测序原理和操作规程。【原理】 ABI ...

提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？ 参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下方法试一试： 1、 在 DNA 未溶出之前，先用一些缓冲液洗去多糖。如可用缓冲液：100 mmol/LTris -HCl(pH=8.0)、5 mmol/L EDTA和0. ...

The In Situ PCR: Amplification and Detection in a Cellular Context Ernest F. Retzel Katherine A. Staskus Janet E. Embretson and Ashley T. Haase Department of Microbiology University of Minnesota Minne ...

Reagents Agarose Ultrapure Ampli Taq polymerase 5 U/µl Buffer 10X and 25 mM MgCl 2 Loading ...

Materials Chromosome medium (one bottle per student)--- KaryoMAX Peripheral Blood Karyotyping Medium #41675-018 These bottles usually come in groups of 10 (each bottle conmtaining 5 mL of media). &nbs ...

Reagents dH 2O Ethanol absolute (70% 90% and 100%) Formamide deionized Ambion Cat. No. 9342 ...

试剂 Earles Balanced Salt Solution (BSS) earles Fetal Bovine Serum Giemsa stain original azure blend Giemsa ...

生物芯片是指包被在硅片、尼龙膜等固相支持物上的高密度的组织、细胞、蛋白质、核酸、糖类以及其它生物组分的微点阵。芯片与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号即可实现对生物样品的分析。目前常见的生物芯片主要有基因芯片，蛋白质芯片、组织芯片等。基因芯片也可以叫做reverse northern - dot blots。目前主要有检测基因突变的基因芯片和检测基因表达水平的基因表达谱芯片。基因芯片技术主要包括 ...

Chromosome # Relative length Centromere index ...

生物芯片技术是应人类基因组计划而发展起来的一项高新技术。从1992年美国人Stephen Foder研制出第一块基因芯片起，生物芯片技术飞速发展：从基因芯片到蛋白质芯片、组织芯片、细胞芯片、芯片实验室，从表达谱芯片到诊断芯片、药物筛选芯片、生物传感器，从寡核苷酸芯片到cDNA芯片、基因组芯片，新兴的生物芯片技术层出不穷，生物芯片的应用领域也在不断扩展，生物芯片发挥的作用也越来越大，特别是在 200 ...

随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展，NDA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是，作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质，其相当部分与活性基因所表达的mRNA之间未能显示出直接的关系，因此使作为高通量基因表达分析平台的cDNA芯片技术的应用过程受到一定的限制。另外，由于蛋白质结构和构象方面的各种微小的化学变化均能引起活性或功能的改 ...

1、芯片实验和定量PCR的优劣比较？ 基因表达谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。 2、在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存？ 可以抽干冷冻保存一年。 3、可否用DNA和芯片杂交？ 不可以，因为芯片上的样品是cDNA而真核基因DNA中普遍存在內显子，核酸杂交无法顺利进行。 4、对于临床症状不明显的的遗传病，如何取样？ 可以从病人抽取血样或者 ...

酵母表达的多肽不出条带原因