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试管婴儿植入前遗传学诊断单细胞PCR的方法

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)简称PCR技术,是近年来发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术,由于其可使特定DNA片段在数量上呈指数增加至可检测范围,故成为基因诊断的重要方法。在PCR基础上衍生的一些扩增技术已用于基因突变的诊断。目前单基因疾病PGD所用的方法主要是基于PCR技术通过检测单细胞靶基因的数目及结构有无异常加以诊断。 一、聚合酶链式反应 ...

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猕猴及其饲养

猕猴:别名黄猴、恒河猴、广西猴,属于猴科,学名为Macaca mulatta。 猕猴是我国常见的一种猴类,体长43~55厘米,尾长15~24厘米。头部呈棕色,背上部棕灰或棕黄色,下部橙黄或橙红色,腹面谈灰黄色。鼻孔向下,具颊囔。臀部的胼胝明显。 营半树栖生活,多栖息在石山峭壁、溪旁沟谷和江河岸边的密林中或疏林岩山上,群居,一般30~50只为一群,大群可达200只左右。善于攀援跳跃,会游泳和模仿人的 ...

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什么是反向PCR(inverse PCR)

反向PCR是一种多聚合酶链式反应(PCR)应用的方法,可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区的末端序列,但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开引物的核心区。这种反向PCR方法可用于扩增本来就在核心区旁边的序列,还可应用于制备未知序列探针或测定 ...

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细胞分离技术

细胞分离技术 一、离心技术 离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体,以及各种大分子基本手段。一般认为,转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机;转速超过25Kr/min,离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min,离心力超过500Kg。 (一)、差速离心(differential centrifugation) 在密度均一的介质中 ...

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养293、293T系列细胞的个人体会

丁香园网友jiangql的观点为: 1、尽量用早期的细胞,传代太多状态不好,产毒也不好,贴壁困难。 2、塑料的瓶子,DMEM+10%的小牛血清即可,要求并不高,ATCC上有详细的培养方法。 3、主要是传代,胰酶消化点到即止,不能和其它成纤维细胞一样。 最近的体会是:不用胰酶,轻轻吹打使细胞脱壁,然后将滴管前端插一个200ul的枪头,再吹打1min左右(有点费力),肉眼看不见大的细胞团即可,此时显微 ...

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real-time PCR技术的原理及应用

real-time PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程。

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实时PCR原理探针翻译

1、实时PCR原理 对扩增产物进行可重复性的定量长期以来一直是科学家和研究者的目标。传统的方法需要对终产物进行凝胶电泳分析。这种方法可以确定目的产物和竞争产物的大小,估算纯度,计算条带强度。然而,所用扩增试剂和体系的变动会造成扩增的终产物的重复性有较大的变动,成为这种方法的主要弊端。 扩增过程的指数期提供给我们最有用的,可重复的数据。在起始的目的DNA量与循环过程的指数期的扩增产物量之间存在着定量 ...

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如何使用血糖检测仪来测血糖

一、工具: 1:血糖检测仪 2:弹射式扎指针 3:血糖接触用芯片 二、方法: 先用酒精擦拭手指,用弹射式扎指针扎中指或无名指,用接触芯片粘手指上的血,插入检测仪中,一会仪器会自动检测出血糖,等稳定不变时就是所测的血糖值。 三、注意: 餐前和餐后:餐前可做,餐后1-2小时可做,否则测定值不准确。 ...

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实验动物生理特征

动物种类 猴 狗 猫 家兔 豚鼠 大鼠 小鼠 生理特征 ...

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手持糖度计的原理及使用方法

一、糖度计的工作原理 光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象,且入射角正弦之比恒为定值,此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下(同一温度、压力)成正比例,故测定果蔬汁液的折光率,可求出果蔬汁液的浓度(含糖量的多少)。 常用仪器是手持式折光仪,也称糖镜、手持式糖度计,通过测定果蔬可溶性固形物含量(含糖量),可 ...

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实验动物血液学指标(表)

动物种类 猴 狗 猫 ...

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Methods for DNA sequencing

A. Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions (26) are modified from those presented earlier (25) by altering the absolute amount ...

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DNA Sequencing

The sequencing reactions described below work perfectly well if you are short of cash to buy sequencing kits. It is based on the Dideoxy sequencing method of Sanger et al. 1977. However due to the num ...

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Polymerase Chain Reaction

Materials: Taq (or other) PCR enzyme (5 Units/ul) PCR enzyme reaction buffer Distilled water (nuclease free) DNA to be used as template such as GAPDH template from Clontech ...

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光合作用的基础试验操作系列五:氧电极法测定光合速率

光合作用的基础试验操作系列四:氧电极法测定光合速率

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红外线二氧化碳分析法测定光合速率

光合作用的基础试验操作系列四:红外线C02分析法测定光合速率

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Real time PCR经验 从RNA的提取到PCR

一 :引物的设计引物的设计对于这个实验至关重要,因为real time pcr的检测灵敏度比较高,所以相应的对引物设计的要求就很高。普通的要求规则大家都知道,还有几点必须注意:1,引物的错配率(引物错配形成引物二聚体,但是SYBR照样能嵌入进去,结果导致实验结果的误差很大,重复性也不好)。2,引物的特异性一定要高(不像常规PCR,引物同源性不高,只要两条产物的片段长度相差足够大,在电泳的时候能够区 ...

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光合作用的基础试验操作系列一:用叶圆片沉浮法观察环境因素对光合作用的影响

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常用细胞凋亡检测方法(图)

一、细胞凋亡的形态学检测 1、光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 (2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋 ...

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光合作用的基础试验操作系列二:植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)

植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)的操作

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