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单核苷酸多态性基因分型系统.pdf ...

1.Wash adherent cells twice in the dish or flask with ice-cold PBS and drain off PBS.Wash non-adherent cells in PBS and centrifuge at 800 to 1000 rpm in a table-top centrifuge for 5 minutes to pellet ...

Buffers: Lysis Buffer (1 liter) 50 mM NaH2PO4 6.90g NaH2PO4.H2O (MW 137.99g/mol ) 300 mM NaCl(up to 2M)17.54gNaCl(MW 58.44)or 60ml 5M 10 ...

Swelling and Storage 1.Resuspend .2 gm of beads (= 1.0 ml swelled bead volume)in 40 ml of distilled water.Let swell for at least 2 hours. 2.Wash beads twice in (10 ml each wash).Spin in clinical or ta ...

GST Protein Prep. Ver.2 1) Grow 50ml of culture in LB or TB +antibiotic o/n at 37_C shaker. 2) Dilute culture in LB or TB +antibiotic 1:10 3 ...

Hancock Laboratory ，Department of Microbiology and ImmunologyUniversity of British ColumbiaBritish ColumbiaCanada http://www.cmdr.ubc.ca/bobh/methods/PROTEINASSAY.htm (Sandermann and Stromiger.1972.J. ...

结晶紫法活性测定 1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞，用0.25%胰酶（以无钙镁离子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培养基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素，pH7.2）吹打细胞，使形成细胞悬液。进行细胞计数，使细胞数为2~2.5×105个/ml。接种于96孔细胞培养板，100µl/孔。接种细胞时须不断摇动细胞悬 ...

(一)蛋白质电泳 1.请参照常规电泳操作. 2.分子量标准: 可选择普通分子量标准或预染的分子量标准.在选择预染的分子量标准时要注意其优点和缺点: 优点: 在电泳过程中可监控蛋白质分离状态; 可指示转印中蛋白质的转印效率. 缺点: 染料影响蛋白质移动速度;分子量测定略欠精确;影响蛋白质与膜的结合力. 购买信息: 中范 ...

在原核蛋白表达过程中，选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素：表达载体、宿主菌株、表达诱导条件以获得最满意的表达效果。事实上，在平时的实验中，最容易被忽视的就是宿主菌的选择――多数人会直接选择自己实验室曾经用过的表达菌株，或者是载体配套的菌株，而不去追究原因――即使表达结果不佳，大多在表达条件和载体上找原因，也不会考究菌株的选择是否适合。 作为原核表达的宿主，对外源基因的表达会产生一定的 ...

T7Select™ 噬菌体展示系统是Novagen开发的基于T7噬菌体(而非传统的M13)创新的基因发现研究产品。目的序列(C-端)与T7基因10 衣壳蛋白而表达得到的多肽和蛋白即可暴露(展示)与病毒(T7噬菌体)的表面。复制周期短，细胞质蛋白组装，操作和储存方便，超高克隆效率，以及T7噬菌体强大的天然特性使Novagen的T7Select成为替代传统M13系统的更好选择，用于高效文库 ...

染色质免疫沉淀法（Chromatin immunoprecitation，ChIP）是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰，如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等，这些共价修饰与真核基因的表达密切相关。根据“组蛋白密码”假说，组蛋白的各种共价修 ...

无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官，或者是从正常的组织突变为肿瘤组织，都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因，因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法，抑制消减杂交（SSH）是比较有效的一种方法。以Clontech的PCR-Select cDNA Subtraction Kit为例：将样品（tester） ...

General Principles of Immunoprecipitation Lysis buffer. The choice of lysis buffer depends on what kind of IP you are doing. RIPA buffer gives the lowest backgroundbut can denature some kinases.It als ...

1)In the cold roomwash cells with cold "Tris" (the same stuff used for TC). Spin down the cells if you are working with suspension cells in a low speed swinging bucket centrifugeresuspend in ...

Lowry Protein Assay Laboratory of P.J.HansenDept.of Animal SciencesUniversity of Florida http://www.animal.ufl.edu/hansen/Protocols/LOWRY.htm The Lowry procedure is one of the most venerable and wide ...

Assemble the following components: •Cellsgrown in 10 cm dishes •Room Temp.PBS •Cold PBS •Cold Sonication Buffer (1% SDS10 mM EDTA50 mM Tris-HCl pH 7.5) Prepare sonication buffe ...

Purification of GST fusion proteins in E.coli GST融合蛋白纯化--纯化小量蛋白 Sugden labMcArdle Laboratory for Cancer ResearchUniversity of Wisconsin-Madison Medical School Small scale fusion protein preparation Gr ...

Buffer A Buffer B ...

主要特点： · 准确灵敏：BCA试剂的蛋白质测定范围是20－2000μg/ml采用加强方法可检测到5μg/ml；MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml。 · 快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。 · 经济实用：除试管外，测定可在微孔板中进行，大大节约样品和试剂用量。 · 不受样品 ...

This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives.Investigators must be aware that they will need to tailor the following protocol for their own research obje ...