采用OG05 差异显示技术,分析水稻稻瘟病抗源材料“ 地谷”叶片受稻瘟病菌侵染前后的基因的表达差异,获得87个差异片段。对这87个差异片段进行了回收、重扩增与克隆,并对其中的81个片段进行了杂交鉴定。斑点杂交结果证实其中6个片段受稻瘟病菌诱导表达。进一步克隆测序并进行数据库比对分析表明其中一个与水稻4号染色体中一推测的苹果酸合成酶高度同源,一个与水稻11号染色体上的RPR1 ...
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的基本原理和分类 在电场中,推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。F=QE质点的前移同 ...
All living organisms have thousands to tens of thousands of unique genes encoded in their genome of which only a small fraction perhaps 15% are expressed in any individual cell. Therefore it is the te ...
荧光辅助糖电泳的优化.pdf ...
做免疫学特别是肿瘤学实验,总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤,老外最常用的是Cr51放射实验,但这个方法在国内的不少地方都不能做,而MTT这个方法又太老了,而且也不准确,那么替代方法就用流式细胞术,又方便,又准确,这也是偶参照老外的方法吧。 1、计数靶细胞,并加入CFSE,使CFSE终浓度达到2uM37度30分钟。 2、拿出后,1000rpm5min可隐约看到细胞染成黄色,PBS洗三次 ...
芯片毛细管电泳一原子荧光在线联用设计.pdf ...
问:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。问:QPCR、DNA检测、PCR之间的关系?答:聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction简称PCR)原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获93年诺贝尔化学奖。因其在病 ...
芯片毛细管电泳电化学检测电极的研究与应用进展.pdf ...
This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives. Investigators must be aware that they will need to tailor the following protocol for their own research obj ...
西他沙星差向异构体的毛细管电泳分离.pdf ...
微流控电泳分离的试样引入技术新进展.pdf ...
双向电泳技术在筛选膀胱癌特异.pdf ...
我欲先构建某一个病毒的cDNA文库(construction of the cDNA phage-display library ),再用噬菌体展示技术来筛与某一受体蛋白对应的病毒表面的配体蛋白。 我想问的是: 1、我应该选择哪种噬菌体作为载体(优点?) 2、文库的构建至关重要,有没有好的专门先用来构建cDNA文库,再做噬菌体展示的试剂盒(厂家、价格?) 3、有没有相关的书、文献推荐 4、该技术的 ...
毛细管电泳技术及其应用进展.pdf ...
The concept of differential display is to use a limited number of short arbitrary primers in combination with the anchored oligo-dT primers to systematically amplify and visualize most of the mRNA in ...
一、实时荧光Taqman 探针设计总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-time PCR的扩增片段是50bp----150bp。当找不到150bp的保守片段时,必须确保探针的片段是保守的。在设计探针和引物时,要同时考虑在两条链上设计引物与探针。但要注意的是:在那条链上设计探针时,就应靠近在同一条链上设计的引物(即上游引 ...
要跑琼脂糖凝胶电泳, 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗?能够照相的清楚的条带,至少需要多少量呢? 参考见解:5ng 已经可以了,但是或许20ng50ng-200ng效果好,在此范围内呈线性。 把210bp的pcr产物进行酶切得到190+20bp的两个片段请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大浓度的胶和多大的电压呢? 参考见解:可以用琼脂糖凝胶电泳分开电压不变可用1.5%到2%的胶20bp得 ...
影响电泳分离的主要因素: 1. 待分离生物大分子的性质:待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说, 子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。 2. 缓冲液的性质:缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度,从而对其带电性质产生影响,溶液pH值距离其等电点愈远,其所带净电荷量就越大,电泳的速度也就越大,尤其对于蛋白质等两性分子,缓冲液pH ...
(一)第一向等电聚焦 1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT, Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混匀。 3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液,加入100ml样品,充分混匀。 4. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条(17cm pH 4-7),室 ...
凋亡细胞核DNA片段检测方法进展.pdf ...